摘要:目的 　 觀察擬亨廷頓病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶改變情況 ,腦黑質(zhì)、海馬部位腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子
(BDNF)和膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)的改變情況及參烏膠囊對(duì)其的干預(yù)作用。方法 　用
線粒體呼吸鏈復(fù)合體 Ⅱ/ Ⅲ抑制劑 ——— 3 - 硝基丙酸(32nitropropionic acid ,32NPA) 20 mg/ kg對(duì) SD 大
鼠隔日腹腔注射連續(xù)造模20 d ,建立 HD大鼠模型。造模的同時(shí) ,用藥組大鼠給予參烏膠囊連續(xù)灌
胃25 d。陽性對(duì)照藥組自造模當(dāng)日起給予氟**醇。應(yīng)用Morris水迷宮及避暗實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)
記憶能力。應(yīng)用**組織化學(xué)染色法檢測(cè)大鼠海馬 CA1及 CA4區(qū)BDNF、 GDNF的細(xì)胞數(shù)量及細(xì)胞
面積。結(jié)果 　 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中 ,模型大鼠的游出時(shí)間及游出距離較對(duì)照組明顯延長(zhǎng) ,參烏膠囊
用藥組可以顯著縮短大鼠的游出時(shí)間及距離。避暗實(shí)驗(yàn)中 ,參烏膠囊用藥組大鼠較模型大鼠進(jìn)入
暗箱的潛伏期分別顯著性延長(zhǎng)56169 s和54124 s。在海馬CA1及CA4區(qū) ,模型組動(dòng)物BDNF、 GDNF
陽性細(xì)胞的表達(dá)明顯較正常對(duì)照組細(xì)胞數(shù)減少 ,陽性細(xì)胞總面積減少。而 962 中劑量組對(duì)于此區(qū)
BDNF、 GDNF陽性細(xì)胞的表達(dá)明顯具增強(qiáng)作用( P < 0101) 。結(jié)論 　參烏膠囊可以明顯增強(qiáng)動(dòng)物學(xué)
習(xí)記憶能力 ,增強(qiáng)32NPA模型大鼠海馬處BDNF及 GDNF的表達(dá)。
關(guān)鍵詞:3 - 硝基丙酸;亨廷頓病;神經(jīng)營養(yǎng)因子;大鼠
中圖分類號(hào):R285. 5
1 　材料與方法
1. 1 　材料
1.1. 1 　動(dòng)物:雄性 SD 大鼠 ,體重 230～260 g ,SPF
級(jí) ,購自中國藥品生物制品檢定所動(dòng)物繁育中心(京
動(dòng)許字D017號(hào)) 。
1. 1. 2　試劑:3 - 硝基丙酸(3 - nitropropionic acid ,32
NPA)為 Sigma 公司產(chǎn)品。甲醛、異戊烷、 30 %過氧化
氫(H2O2) 、二甲苯、中性樹膠均購自北京化學(xué)試劑公
司。BDNF、 GDNF抗體、二抗 Ra IgG/Mo IgG、三抗 S
- A/ HRP、封閉用羊血清、 DAB購自北京中山生物技
術(shù)有限公司。
1. 1. 3 　**:參烏膠囊由人參、制首烏、石菖蒲等 6
味中藥組成 ,由我室自行研制、委托北京第四制藥廠
加工 ,批號(hào) 980515 ,每克干粉含生藥 6125 g。實(shí)驗(yàn)
中 ,采用干粉劑量 ,溶于水 ,制成溶液應(yīng)用。氟**
醇 ,北京市雙橋制藥廠生產(chǎn) ,批號(hào) 950202 ,京衛(wèi)藥準(zhǔn)
字(86)第106號(hào)。
1. 1. 4 　儀器:Noesis Vision 公司 VISILOG5. 0 圖象分
析系統(tǒng) ,恒溫冷凍切片機(jī)(英國山盾公司 ASE - 620
院**研究所。
1. 2 　方法
1. 2. 1 　分組及給藥:雄性 SD 大鼠隨機(jī)分組。正常
對(duì)照組 ,蒸餾水灌胃5 d后 ,隔日腹腔注射與模型組
等劑量的生理鹽水; 模型組 ,32NPA 20 mg/ kg 腹腔
注射 ,隔日 1 次 ,共造模 20 d ;參烏膠囊小、中、大劑
量組分別給予參烏膠囊 0145 g/ kg、 019 g/ kg 和 118
g/ kg灌胃5 d后腹腔注射 32NPA 造模 ,再連續(xù)灌服
參烏膠囊20 d ;陽性對(duì)照藥組:造模當(dāng)天開始給予氟
**醇011μg/ kg體重 ,后隔日遞增011μg/ kg體重 ,
直至1μg/ kg體重。
1. 2. 2　 32NPA致神經(jīng)退行性**大鼠模型的建立:
每100 mg 32NPA溶于1 mL 無水乙醇中 ,再用 019 %
無菌生理鹽水稀釋至 4 g/ L ,調(diào)節(jié)其 pH為 7. 4。模
型組動(dòng)物隔天腹腔注射 32NPA 20 mg/ kg ,共造模 20
d。
1. 2. 3 　大鼠 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn):參照 Morris R[1 ]
及
洪岸[2 ]
,匡培梓[3 ]
等的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
大鼠每天訓(xùn)練2次 ,共訓(xùn)練4 d ,第1天訓(xùn)練時(shí) ,
型) ,Morris水迷宮箱、避暗箱均購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)所選入池位置為站臺(tái)所對(duì)及相鄰象限 ,將大鼠于象