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動(dòng)物懸尾實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)實(shí)例（1）
日期：2024-12-07 12:14
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摘要：
動(dòng)物懸尾實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)實(shí)例（1）
【摘要】 目的研究芒果苷(mangiferin)對(duì)實(shí)驗(yàn)性行為絕望小鼠的抗抑郁作用。方法采用小鼠懸尾應(yīng)激實(shí)驗(yàn)和小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。結(jié)果芒果苷在60.0，30.0，15.0 mg·kg-1劑量下顯著縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間（P﹤0.05或P﹤0.01），芒果苷60.0 mg·kg-1能明顯縮短小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P﹤0.01）。結(jié)論芒果苷在小鼠行為絕望模型實(shí)驗(yàn)中具有一定的抗抑郁作用。
【關(guān)鍵詞】 芒果苷 懸尾實(shí)驗(yàn) 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 小鼠
抑郁癥是一類持續(xù)反復(fù)發(fā)作的情緒障礙、嚴(yán)重危害人類身心健康的常見(jiàn)精神**，其病理機(jī)制尚未徹底闡明，主要表現(xiàn)為情緒持久低落，思維遲鈍，意志行為減少，嚴(yán)重者還伴有**傾向。現(xiàn)代城市生活節(jié)奏急速，壓力沉重，抑郁癥已經(jīng)成為*常見(jiàn)的心理**之一，列世界十大**第五位［1，2］，而目前高效低毒的 **抑郁癥**較為貧乏，因此抑郁癥的防治和抗抑郁新藥的研制已成為當(dāng)今國(guó)際醫(yī)藥界前沿?zé)狳c(diǎn)研究課題之一。
芒果苷是一種四羥基吡酮的碳糖苷，屬雙苯吡酮類化合物，是芒果葉的主要成分之一。它具有抗應(yīng)激［3］、抗脂質(zhì)過(guò)氧化［4］，降血糖［5］、抗腫瘤、**調(diào)節(jié)［6］等作用。本研究利用小鼠行為絕望模型，研究芒果苷的抗抑郁作用。
1 材料
1.1 **芒果苷購(gòu)由廣西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，存放于干燥器中。實(shí)驗(yàn)時(shí)用吐溫-80配成混懸液備用。鹽酸氯米帕明片，上海九福藥業(yè)有限公司，批號(hào)030823；利血平，上海醫(yī)科大學(xué)紅旗制藥廠，批號(hào)030907。
1.2 動(dòng)物健康昆明種小鼠，雌雄兼用，體重18～22 g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：桂檢證字(2000)第001號(hào)。
2 方法
2.1 分組及給藥將健康昆明種小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組（生理鹽水）；陽(yáng)性對(duì)照組（鹽酸氯米帕明20.0 mg·kg-1）；芒果苷大、中、小劑量組（60.0，30.0，15.0 mg·kg-1芒果苷）。灌胃（ig）給藥0.1 ml/10 g，1次/d，連續(xù)7 d。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由取食和飲水。
2.2 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)［7］末次給藥1 h后，將小鼠尾部距末端約1 cm處用夾子固定，使其倒吊于距地面15 cm左右的橫桿上，動(dòng)物為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)，但活動(dòng)一段時(shí)間后，出現(xiàn)間斷性不動(dòng)，顯示失望狀態(tài)，累計(jì)各組 8 min內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間。
2.3 強(qiáng)迫小鼠游泳實(shí)驗(yàn)［7］末次給藥1 h后，將小鼠放于直徑約18 cm，水深18 cm，水溫25℃的容器內(nèi)，測(cè)定8 min之內(nèi)小鼠漂浮不動(dòng)的時(shí)間(即小鼠在水中停止掙扎，或動(dòng)物呈漂浮狀態(tài)，僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面)。
2.4 數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以表示，組間比較用t檢驗(yàn)。使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。
3 結(jié)果
3.1 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)在經(jīng)典的小鼠懸尾抑郁模型中，連續(xù)給予相應(yīng)**7 d， 芒果苷在60.0，30.0，15.0 mg·kg-1劑量下顯著縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間（P﹤0.05或P﹤0.01），陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸氯米帕明20.0 mg·kg-1也顯示同樣作用（P﹤0.01）。見(jiàn)表1。表1 對(duì)小鼠尾懸實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間的影響與空白對(duì)照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01;n=10
3.2 強(qiáng)迫小鼠游泳實(shí)驗(yàn)小鼠在強(qiáng)迫游泳模型中出現(xiàn)漂浮不動(dòng)狀態(tài)反映了動(dòng)物的絕望行為， 鹽酸氯米帕明20.0 mg·kg-1，芒果苷60.0 mg·kg-1能明顯縮短小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P﹤0.01），提示芒果苷在此模型上有抗抑郁作用，見(jiàn)表2。表2 對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間的影響與空白對(duì)照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01；n=10
4 討論
抑郁癥并非一般的情緒或性格問(wèn)題，而是一種有明確生物學(xué)基礎(chǔ)的**，是先天遺傳因素、早年神經(jīng)發(fā)育異常和后天不利環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，其發(fā)病機(jī)理尚未完全清楚，可能涉及諸多因素的改變［1］：①**神經(jīng)系統(tǒng)組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，抑郁癥患者可出現(xiàn)大腦和小腦均有萎縮、額葉萎縮和功能低下、海馬神經(jīng)元細(xì)胞的丟失和海馬及額葉體積的減少等。②**單胺類神經(jīng)遞質(zhì)和相應(yīng)受體功能的變化，如去甲腎上腺素(NE)、5-羥色胺(5-HT) 、多巴胺(DA)、乙酰膽堿(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)等的不足。臨床常用的抗抑郁藥基本上通過(guò)影響這些遞質(zhì)而產(chǎn)生作用。③神經(jīng)***功能的變化，下丘腦–垂體–腎上腺軸(hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA) 功能異常在抑郁癥的發(fā)生中起著非常重要的作用，研究顯示抑郁癥患者的血漿皮質(zhì)醇分泌增加，失去了正常人夜間自發(fā)性分泌抑制的節(jié)律，整天處于腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)狀態(tài)；腎上腺皮質(zhì)增生、垂體也增大；④**神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能及神經(jīng)***功能在抑郁癥發(fā)病過(guò)程中的相互作用，他們?cè)谝钟舭Y的發(fā)病過(guò)程中彼此影響，長(zhǎng)期不愈的抑郁癥將逐漸發(fā)展為經(jīng)組織學(xué)改變?yōu)榛A(chǔ)的不可逆的認(rèn)知功能損害。
臨床常用的抗抑郁藥有：①三環(huán)類抗抑郁制劑如米帕明、氯米帕明；②單胺氧化酶抑制劑如嗎氯貝胺；③選擇性5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑如氟西汀、舍曲林；④選擇性去甲腎上腺素(NE)再攝取抑制劑如瑞波西?。虎軳E和多巴胺(DA)再攝取抑制劑如安非他酮；⑥5-HT及NE再攝取抑制劑如文拉法辛；⑦NE能和特異性5-HT能抗抑郁劑如米氯平；⑧5-羥色胺2型受體(5-HT2)受體拮抗劑及5-HT2再攝取抑制劑如尼法唑酮、曲唑酮；⑨其他：噻奈普汀、圣約翰草、金絲桃素。這些**心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等**反應(yīng)常見(jiàn)［8］。
小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是行為藥理實(shí)驗(yàn)中用于篩選和觀察抗抑郁**可靠的實(shí)驗(yàn)方法。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是利用動(dòng)物不能逃出惡劣環(huán)境，導(dǎo)致動(dòng)物行為絕望的一種模型。實(shí)驗(yàn)時(shí)，將動(dòng)物放在盛水的容器內(nèi)強(qiáng)迫其游泳，動(dòng)物*初的反應(yīng)是游動(dòng)，試圖逃出，隨之感到逃脫是不可能的，便不再掙扎和游動(dòng)，僅將頭部露出水面，肢體漂浮，維持一種不動(dòng)狀態(tài)，此中狀態(tài)稱為“行為絕望”。小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)時(shí)，懸尾小鼠為克服倒懸體位，在實(shí)驗(yàn)初始表現(xiàn)為不停掙扎、扭動(dòng)，希望能翻上來(lái)，但隨之感到絕望，陷入一種不動(dòng)狀態(tài)［7］。本研究結(jié)果顯示，芒果苷可顯著縮短懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)小鼠的不動(dòng)時(shí)間，表明在小鼠行為絕望模型實(shí)驗(yàn)中具有一定的抗抑郁作用。本文僅在芒果苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性行為絕望小鼠的抗抑郁作用作了初步的探索，對(duì)其它動(dòng)物模型的抗抑郁作用及機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】 芒果苷 懸尾實(shí)驗(yàn) 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 小鼠
抑郁癥是一類持續(xù)反復(fù)發(fā)作的情緒障礙、嚴(yán)重危害人類身心健康的常見(jiàn)精神**，其病理機(jī)制尚未徹底闡明，主要表現(xiàn)為情緒持久低落，思維遲鈍，意志行為減少，嚴(yán)重者還伴有**傾向。現(xiàn)代城市生活節(jié)奏急速，壓力沉重，抑郁癥已經(jīng)成為*常見(jiàn)的心理**之一，列世界十大**第五位［1，2］，而目前高效低毒的 **抑郁癥**較為貧乏，因此抑郁癥的防治和抗抑郁新藥的研制已成為當(dāng)今國(guó)際醫(yī)藥界前沿?zé)狳c(diǎn)研究課題之一。
芒果苷是一種四羥基吡酮的碳糖苷，屬雙苯吡酮類化合物，是芒果葉的主要成分之一。它具有抗應(yīng)激［3］、抗脂質(zhì)過(guò)氧化［4］，降血糖［5］、抗腫瘤、**調(diào)節(jié)［6］等作用。本研究利用小鼠行為絕望模型，研究芒果苷的抗抑郁作用。
1 材料
1.1 **芒果苷購(gòu)由廣西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，存放于干燥器中。實(shí)驗(yàn)時(shí)用吐溫-80配成混懸液備用。鹽酸氯米帕明片，上海九福藥業(yè)有限公司，批號(hào)030823；利血平，上海醫(yī)科大學(xué)紅旗制藥廠，批號(hào)030907。
1.2 動(dòng)物健康昆明種小鼠，雌雄兼用，體重18～22 g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：桂檢證字(2000)第001號(hào)。
2 方法
2.1 分組及給藥將健康昆明種小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對(duì)照組（生理鹽水）；陽(yáng)性對(duì)照組（鹽酸氯米帕明20.0 mg·kg-1）；芒果苷大、中、小劑量組（60.0，30.0，15.0 mg·kg-1芒果苷）。灌胃（ig）給藥0.1 ml/10 g，1次/d，連續(xù)7 d。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由取食和飲水。
2.2 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)［7］末次給藥1 h后，將小鼠尾部距末端約1 cm處用夾子固定，使其倒吊于距地面15 cm左右的橫桿上，動(dòng)物為克服不正常體位而掙扎活動(dòng)，但活動(dòng)一段時(shí)間后，出現(xiàn)間斷性不動(dòng)，顯示失望狀態(tài)，累計(jì)各組 8 min內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間。
2.3 強(qiáng)迫小鼠游泳實(shí)驗(yàn)［7］末次給藥1 h后，將小鼠放于直徑約18 cm，水深18 cm，水溫25℃的容器內(nèi)，測(cè)定8 min之內(nèi)小鼠漂浮不動(dòng)的時(shí)間(即小鼠在水中停止掙扎，或動(dòng)物呈漂浮狀態(tài)，僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面)。
2.4 數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以表示，組間比較用t檢驗(yàn)。使用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行。
3 結(jié)果
3.1 小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)在經(jīng)典的小鼠懸尾抑郁模型中，連續(xù)給予相應(yīng)**7 d， 芒果苷在60.0，30.0，15.0 mg·kg-1劑量下顯著縮短小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間（P﹤0.05或P﹤0.01），陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸氯米帕明20.0 mg·kg-1也顯示同樣作用（P﹤0.01）。見(jiàn)表1。表1 對(duì)小鼠尾懸實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間的影響與空白對(duì)照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01;n=10
3.2 強(qiáng)迫小鼠游泳實(shí)驗(yàn)小鼠在強(qiáng)迫游泳模型中出現(xiàn)漂浮不動(dòng)狀態(tài)反映了動(dòng)物的絕望行為， 鹽酸氯米帕明20.0 mg·kg-1，芒果苷60.0 mg·kg-1能明顯縮短小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（P﹤0.01），提示芒果苷在此模型上有抗抑郁作用，見(jiàn)表2。表2 對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間的影響與空白對(duì)照組比較，*P﹤0.05，**P﹤0.01；n=10
4 討論
抑郁癥并非一般的情緒或性格問(wèn)題，而是一種有明確生物學(xué)基礎(chǔ)的**，是先天遺傳因素、早年神經(jīng)發(fā)育異常和后天不利環(huán)境因素共同作用的結(jié)果，其發(fā)病機(jī)理尚未完全清楚，可能涉及諸多因素的改變［1］：①**神經(jīng)系統(tǒng)組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，抑郁癥患者可出現(xiàn)大腦和小腦均有萎縮、額葉萎縮和功能低下、海馬神經(jīng)元細(xì)胞的丟失和海馬及額葉體積的減少等。②**單胺類神經(jīng)遞質(zhì)和相應(yīng)受體功能的變化，如去甲腎上腺素(NE)、5-羥色胺(5-HT) 、多巴胺(DA)、乙酰膽堿(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)等的不足。臨床常用的抗抑郁藥基本上通過(guò)影響這些遞質(zhì)而產(chǎn)生作用。③神經(jīng)***功能的變化，下丘腦–垂體–腎上腺軸(hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA) 功能異常在抑郁癥的發(fā)生中起著非常重要的作用，研究顯示抑郁癥患者的血漿皮質(zhì)醇分泌增加，失去了正常人夜間自發(fā)性分泌抑制的節(jié)律，整天處于腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)狀態(tài)；腎上腺皮質(zhì)增生、垂體也增大；④**神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、功能及神經(jīng)***功能在抑郁癥發(fā)病過(guò)程中的相互作用，他們?cè)谝钟舭Y的發(fā)病過(guò)程中彼此影響，長(zhǎng)期不愈的抑郁癥將逐漸發(fā)展為經(jīng)組織學(xué)改變?yōu)榛A(chǔ)的不可逆的認(rèn)知功能損害。
臨床常用的抗抑郁藥有：①三環(huán)類抗抑郁制劑如米帕明、氯米帕明；②單胺氧化酶抑制劑如嗎氯貝胺；③選擇性5-羥色胺(5-HT)再攝取抑制劑如氟西汀、舍曲林；④選擇性去甲腎上腺素(NE)再攝取抑制劑如瑞波西?。虎軳E和多巴胺(DA)再攝取抑制劑如安非他酮；⑥5-HT及NE再攝取抑制劑如文拉法辛；⑦NE能和特異性5-HT能抗抑郁劑如米氯平；⑧5-羥色胺2型受體(5-HT2)受體拮抗劑及5-HT2再攝取抑制劑如尼法唑酮、曲唑酮；⑨其他：噻奈普汀、圣約翰草、金絲桃素。這些**心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等**反應(yīng)常見(jiàn)［8］。
小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是行為藥理實(shí)驗(yàn)中用于篩選和觀察抗抑郁**可靠的實(shí)驗(yàn)方法。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是利用動(dòng)物不能逃出惡劣環(huán)境，導(dǎo)致動(dòng)物行為絕望的一種模型。實(shí)驗(yàn)時(shí)，將動(dòng)物放在盛水的容器內(nèi)強(qiáng)迫其游泳，動(dòng)物*初的反應(yīng)是游動(dòng)，試圖逃出，隨之感到逃脫是不可能的，便不再掙扎和游動(dòng)，僅將頭部露出水面，肢體漂浮，維持一種不動(dòng)狀態(tài)，此中狀態(tài)稱為“行為絕望”。小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)時(shí)，懸尾小鼠為克服倒懸體位，在實(shí)驗(yàn)初始表現(xiàn)為不停掙扎、扭動(dòng)，希望能翻上來(lái)，但隨之感到絕望，陷入一種不動(dòng)狀態(tài)［7］。本研究結(jié)果顯示，芒果苷可顯著縮短懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)小鼠的不動(dòng)時(shí)間，表明在小鼠行為絕望模型實(shí)驗(yàn)中具有一定的抗抑郁作用。本文僅在芒果苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性行為絕望小鼠的抗抑郁作用作了初步的探索，對(duì)其它動(dòng)物模型的抗抑郁作用及機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。
