聯(lián)系我們
聯(lián)系人：
總經(jīng)理 13917267438 （趙）（同微信）
閔經(jīng)理 13818341261
任經(jīng)理 13085076120
李經(jīng)理 15801723647
聯(lián)系電話(huà)：021-54172191
傳真號(hào)碼：021-54132629
QQ：2025986469
Email：2025986469@qq.com
公司地址： 上海市閔行區(qū)金平路328弄124號(hào)1002室
郵政編號(hào)：200240
公司網(wǎng)址：educationguruz.com
文章詳情
神經(jīng)科**動(dòng)物模型的制作經(jīng)驗(yàn)方法交流
日期：2024-12-06 02:58
瀏覽次數(shù)：2264
摘要：
神經(jīng)科**動(dòng)物模型的制作經(jīng)驗(yàn)方法交流
大家在科研實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常涉及到動(dòng)物模型的制作，望大家將這方面文獻(xiàn)以及經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行交流。
腦缺血模型的制作：
制作腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷姆椒ê芏啵Ｓ梅椒ㄖ饕薪Y(jié)扎法和栓塞法兩種，結(jié)扎法是運(yùn)用外科手段結(jié)扎腦的供血?jiǎng)用}，中止腦的血氧供應(yīng)，它可以進(jìn)一步分為顱內(nèi)結(jié)扎和顱外結(jié)扎。顱外結(jié)扎主要是用于制作全腦缺血模型，可進(jìn)一步分為①4血管結(jié)扎，即結(jié)扎頸總動(dòng)脈/頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈；②2血管結(jié)扎，即結(jié)扎兩側(cè)頸總/頸內(nèi)動(dòng)脈，同時(shí)抽取動(dòng)物一定量的血液，使血壓降低到50mmHg以下，達(dá)到造成全腦缺血的目的。這種方法因?yàn)樾枰O(jiān)視和控制血壓，實(shí)驗(yàn)條件要求嚴(yán)格，且因椎動(dòng)脈未予結(jié)扎，往往造成的腦缺血是不完全的。另一種兩血管結(jié)扎法是用沙土鼠（Gerbil）進(jìn)行，利用沙土鼠腦底Willis動(dòng)脈環(huán)發(fā)育不全后交通動(dòng)脈缺如的特點(diǎn)，結(jié)扎兩側(cè)的頸總或頸內(nèi)動(dòng)脈造成前腦缺血。栓塞法是用自體血凝塊、塑料或玻璃微球來(lái)栓塞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物頸動(dòng)脈、腦內(nèi)大動(dòng)脈或微動(dòng)脈，造成腦組織缺血模型，該法簡(jiǎn)便易行，但可控性、可重復(fù)性差，且不能再灌流。
1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇對(duì)腦缺血模型是非常重要的，理論上兔、貓、狗和靈長(zhǎng)類(lèi)都可被用來(lái)制作腦缺血模型，但更多的人傾向于選擇使用鼠作實(shí)驗(yàn)。這主要是基于如下認(rèn)識(shí)：因?yàn)槭笫切?dòng)物，價(jià)格便宜，軀體小，消耗藥品試劑較少；鼠的腦血管解剖和生理與**動(dòng)物無(wú)明顯差異；一些在體的實(shí)驗(yàn)操作更容易進(jìn)行，甚至在倫理學(xué)上更容易接受等等。
2. 儀器和設(shè)備
制作腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷膬x器設(shè)備分為二類(lèi)：一類(lèi)是為動(dòng)物手術(shù)服務(wù)，包括一套手術(shù)器械，手術(shù)顯微鏡，顱鉆，腦立體定位儀，溫度控制裝置（控溫儀、紅外線(xiàn)燈和加熱墊），呼吸機(jī)；另一類(lèi)是用于監(jiān)測(cè)和分析的儀器，包括腦電記錄裝置，血壓記錄裝置，多譜勒血流記錄儀，血?dú)庋欠治鰞x。
3. 四血管結(jié)扎腦缺血模型的制作
這是一個(gè)廣泛應(yīng)用的腦缺血模型。*常用的為Pulsinelli的改良方法。該模型選用Wistar大鼠，可以在清醒和自由運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下制作嚴(yán)重的腦缺血和恒定的病理學(xué)改變。該模型分二個(gè)階段制作，**階段：將動(dòng)物麻醉，按置在腦立體定位儀上，調(diào)節(jié)耳桿和門(mén)齒高度使鼠頭前傾約30度，同時(shí)用橡皮栓住鼠尾給以輕度的牽拉力，使頸椎伸直，翼孔呈水平位，便于觀察。枕骨下**頸椎水平正中切口，仔細(xì)分離兩側(cè)**頸椎橫突，暴露**頸椎橫突上的翼孔，翼孔下有兩則椎動(dòng)脈通過(guò)，用小的單極或雙極電凝器插入翼孔燒灼閉塞雙側(cè)椎動(dòng)脈。然后動(dòng)物取背位，頸部正中切口，分離頸動(dòng)脈鞘，注意不要損傷迷走神經(jīng)和頸動(dòng)脈鞘后方的頸交感干。用外科縫線(xiàn)套住兩側(cè)頸總動(dòng)脈（不要結(jié)扎），將線(xiàn)頭藏于皮下，簡(jiǎn)單關(guān)閉切口；**階段：待動(dòng)物麻醉清醒后自由飲水，但禁食12～24小時(shí)后，將動(dòng)物于清醒狀態(tài)下，取背位，分別用繩子固定四肢和門(mén)齒，以控制動(dòng)物掙扎。小心分離頸前部的切口，辯認(rèn)套在頸總動(dòng)脈上的縫線(xiàn)，輕輕牽起，將線(xiàn)套收緊或者用微血管夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈。此時(shí)在2～3秒鐘內(nèi)大鼠將昏迷并喪失對(duì)光反射。缺血后2～3分鐘可出現(xiàn)異常腦電圖，并持續(xù)到缺血結(jié)束。頸總動(dòng)脈的關(guān)閉時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)而定，通常取10～20分鐘?；杳院头瓷湎侨毖欠癯晒Φ臉?biāo)志。據(jù)統(tǒng)計(jì)約有四分之三的大鼠經(jīng)上述二階段處理可導(dǎo)致缺血成功。缺血期間自主呼吸和角膜反射的存在提示腦干血液供應(yīng)的存在，這是因?yàn)榧顾枨皠?dòng)脈供血的原因。缺血結(jié)束后松開(kāi)頸總動(dòng)脈，動(dòng)物通常很快清醒。但在24～72小時(shí)內(nèi)將有一部分動(dòng)物出現(xiàn)缺血性抽搐，如果缺血持續(xù)30分鐘，在24小時(shí)內(nèi)將有20%、72小時(shí)有40%的鼠發(fā)生缺血性抽搐，這些發(fā)生抽搐的鼠在結(jié)果分析時(shí)應(yīng)被排除。
約有四分之一的鼠缺血不成功，其中2/3是昏迷不完全，另外1/3死于呼吸衰竭。該模型的制作的關(guān)鍵是燒灼椎動(dòng)脈，由于椎動(dòng)脈不能直接看到，這就需要操作者具有一定的經(jīng)驗(yàn)，適當(dāng)?shù)恼莆諢频臅r(shí)間和電極與翼孔的角度，同時(shí)要避免損傷腦干。
4.大腦中動(dòng)脈結(jié)扎模型的制作
結(jié)扎大腦中動(dòng)脈（MCA）是制作局灶性腦缺血模型的常用方法，早期大多用較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（貓、狗）制作，近年來(lái)用大鼠制作的大腦中動(dòng)脈結(jié)扎模型已被大家接受并得到廣泛的應(yīng)用。目前比較標(biāo)準(zhǔn)的模型是Tamura 1981年報(bào)道的方法[5]。他們于近側(cè)段結(jié)扎SD大鼠的大腦中動(dòng)脈，并詳細(xì)比較了結(jié)扎后腦血流改變和組織病理學(xué)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié)扎后4小時(shí)產(chǎn)生較為恒定的紋狀體和皮質(zhì)損害的腦血流（CBF）閾值是25ml/100g/min，這一閾值明顯較貓、猴要高。具體操作程序是：動(dòng)物麻醉下，頭皮切口，分離顳肌，取外眥和外耳門(mén)連線(xiàn)的中點(diǎn)，用牙科鉆或環(huán)形顱鉆鉆開(kāi)顱骨、暴露大腦中動(dòng)脈，于手術(shù)顯微鏡下辯認(rèn)大腦中動(dòng)脈及其分枝，在分枝的下方即MCA的近段，分離結(jié)扎或燒灼MCA，同時(shí)取頸部切口分離結(jié)扎同側(cè)的頸總動(dòng)脈。在分離結(jié)扎或燒灼MCA時(shí)，應(yīng)避免損傷附近的腦組織，通常用鈍頭的直角鉤子固定于定位儀上，操縱定位儀旋鈕，輕輕地將MCA提起，然后燒灼或結(jié)扎。該模型操作的關(guān)鍵有兩點(diǎn)：(1)**的定位結(jié)扎部位，一定要在MCA的豆紋動(dòng)脈分枝的下方，如果在其上方結(jié)扎將很少出現(xiàn)皮質(zhì)和基底節(jié)梗塞灶。但是在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)往往不能辯認(rèn)出MCA的分支，此時(shí)可以嗅溝為標(biāo)志，在其以下進(jìn)行結(jié)扎；(2)同側(cè)頸總動(dòng)脈的長(zhǎng)久結(jié)扎，能夠加重MCA供血區(qū)的缺血程度，是恒定的腦梗塞出現(xiàn)的必要條件，有時(shí)甚至配以暫時(shí)的對(duì)側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎。
該法的優(yōu)勢(shì)是病理生理變化接近人類(lèi)的MCA栓塞，經(jīng)改進(jìn)后也可進(jìn)行重灌流研究。其缺點(diǎn)是開(kāi)顱破壞了顱內(nèi)壓的恒定，擾亂了腦脊液循環(huán)的動(dòng)力學(xué)，并易致**侵入，從而影響組織病理學(xué)評(píng)價(jià)。此外，附著在MCA上交感神經(jīng)纖維可因結(jié)扎或電凝而損傷，使血管的自調(diào)節(jié)功能受損。
5、腦缺血模型的測(cè)量指標(biāo)
用于腦制備評(píng)價(jià)的測(cè)量指標(biāo)很多，包括行為學(xué)、組織病理學(xué)、生物化學(xué)、生理學(xué)和分子生物學(xué)。具體地如何選擇評(píng)價(jià)指標(biāo)要根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)者所要試驗(yàn)的假說(shuō)來(lái)決定。一般的指標(biāo)有死亡率、神經(jīng)病學(xué)缺失、行為學(xué)損害、組織病理學(xué)損害等等。1. 死亡率是一個(gè)比較簡(jiǎn)便的指標(biāo)，在研究**療效時(shí)有一定的作用，但對(duì)于腦缺血操作機(jī)制的研究所提供的信息非常有限；2. 神經(jīng)病學(xué)缺失的記分方法：這是模擬人類(lèi)卒中后的臨床癥狀進(jìn)行評(píng)分，但在實(shí)際應(yīng)用中其指標(biāo)變異太大且客觀性不夠，應(yīng)用受到限制。例如大腦中動(dòng)脈結(jié)扎后是否出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)損害更多的是決定于缺血是否累及內(nèi)囊而與梗塞灶的大小關(guān)系不大。常用大腦中動(dòng)脈結(jié)扎后的神經(jīng)缺失評(píng)價(jià)為5級(jí)記分法：無(wú)神經(jīng)缺失記為0級(jí)；對(duì)側(cè)前肢不能充分伸直，顯示輕度局灶性神經(jīng)病缺失記為1級(jí)；2級(jí)為中度局灶性神經(jīng)損害，動(dòng)物向?qū)?cè)、旋轉(zhuǎn)；顯示嚴(yán)重的局灶性神經(jīng)損害為3級(jí)，動(dòng)物倒向?qū)?cè)；4級(jí)損害是不能自發(fā)行走，并伴有不同程度的意識(shí)障礙；3. 復(fù)雜的行為學(xué)指標(biāo)對(duì)評(píng)價(jià)缺血損傷有一定的作用。如逃避反射的跳臺(tái)試驗(yàn)、Y型迷宮和Morris水迷宮等，但這類(lèi)指標(biāo)要求較高，需對(duì)研究人員和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行專(zhuān)門(mén)的訓(xùn)練，花費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)。許多研究人員選擇更為客觀的測(cè)量指標(biāo)，如CBF、腦的糖代謝和組織病理學(xué)觀察。要注意的是這類(lèi)指標(biāo)的腦區(qū)間的差異較大，需同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)分析。在上述指標(biāo)中評(píng)價(jià)缺血性損害的金標(biāo)準(zhǔn)（gold standard）是組織病理學(xué)觀察。例如大腦中動(dòng)脈結(jié)扎后，用腦梗塞灶體積的大小、半影區(qū)的大小來(lái)評(píng)價(jià)缺血損害的程度。全腦缺血模型鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞丟失的數(shù)量，或者紋狀體內(nèi)神經(jīng)元死亡的數(shù)量來(lái)評(píng)價(jià)全腦一過(guò)性缺血損害的程度和某些**的**效果。
腦缺血模型的制作：
制作腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷姆椒ê芏啵Ｓ梅椒ㄖ饕薪Y(jié)扎法和栓塞法兩種，結(jié)扎法是運(yùn)用外科手段結(jié)扎腦的供血?jiǎng)用}，中止腦的血氧供應(yīng)，它可以進(jìn)一步分為顱內(nèi)結(jié)扎和顱外結(jié)扎。顱外結(jié)扎主要是用于制作全腦缺血模型，可進(jìn)一步分為①4血管結(jié)扎，即結(jié)扎頸總動(dòng)脈/頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈；②2血管結(jié)扎，即結(jié)扎兩側(cè)頸總/頸內(nèi)動(dòng)脈，同時(shí)抽取動(dòng)物一定量的血液，使血壓降低到50mmHg以下，達(dá)到造成全腦缺血的目的。這種方法因?yàn)樾枰O(jiān)視和控制血壓，實(shí)驗(yàn)條件要求嚴(yán)格，且因椎動(dòng)脈未予結(jié)扎，往往造成的腦缺血是不完全的。另一種兩血管結(jié)扎法是用沙土鼠（Gerbil）進(jìn)行，利用沙土鼠腦底Willis動(dòng)脈環(huán)發(fā)育不全后交通動(dòng)脈缺如的特點(diǎn)，結(jié)扎兩側(cè)的頸總或頸內(nèi)動(dòng)脈造成前腦缺血。栓塞法是用自體血凝塊、塑料或玻璃微球來(lái)栓塞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物頸動(dòng)脈、腦內(nèi)大動(dòng)脈或微動(dòng)脈，造成腦組織缺血模型，該法簡(jiǎn)便易行，但可控性、可重復(fù)性差，且不能再灌流。
1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇對(duì)腦缺血模型是非常重要的，理論上兔、貓、狗和靈長(zhǎng)類(lèi)都可被用來(lái)制作腦缺血模型，但更多的人傾向于選擇使用鼠作實(shí)驗(yàn)。這主要是基于如下認(rèn)識(shí)：因?yàn)槭笫切?dòng)物，價(jià)格便宜，軀體小，消耗藥品試劑較少；鼠的腦血管解剖和生理與**動(dòng)物無(wú)明顯差異；一些在體的實(shí)驗(yàn)操作更容易進(jìn)行，甚至在倫理學(xué)上更容易接受等等。
2. 儀器和設(shè)備
制作腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷膬x器設(shè)備分為二類(lèi)：一類(lèi)是為動(dòng)物手術(shù)服務(wù)，包括一套手術(shù)器械，手術(shù)顯微鏡，顱鉆，腦立體定位儀，溫度控制裝置（控溫儀、紅外線(xiàn)燈和加熱墊），呼吸機(jī)；另一類(lèi)是用于監(jiān)測(cè)和分析的儀器，包括腦電記錄裝置，血壓記錄裝置，多譜勒血流記錄儀，血?dú)庋欠治鰞x。
3. 四血管結(jié)扎腦缺血模型的制作
這是一個(gè)廣泛應(yīng)用的腦缺血模型。*常用的為Pulsinelli的改良方法。該模型選用Wistar大鼠，可以在清醒和自由運(yùn)動(dòng)狀態(tài)下制作嚴(yán)重的腦缺血和恒定的病理學(xué)改變。該模型分二個(gè)階段制作，**階段：將動(dòng)物麻醉，按置在腦立體定位儀上，調(diào)節(jié)耳桿和門(mén)齒高度使鼠頭前傾約30度，同時(shí)用橡皮栓住鼠尾給以輕度的牽拉力，使頸椎伸直，翼孔呈水平位，便于觀察。枕骨下**頸椎水平正中切口，仔細(xì)分離兩側(cè)**頸椎橫突，暴露**頸椎橫突上的翼孔，翼孔下有兩則椎動(dòng)脈通過(guò)，用小的單極或雙極電凝器插入翼孔燒灼閉塞雙側(cè)椎動(dòng)脈。然后動(dòng)物取背位，頸部正中切口，分離頸動(dòng)脈鞘，注意不要損傷迷走神經(jīng)和頸動(dòng)脈鞘后方的頸交感干。用外科縫線(xiàn)套住兩側(cè)頸總動(dòng)脈（不要結(jié)扎），將線(xiàn)頭藏于皮下，簡(jiǎn)單關(guān)閉切口；**階段：待動(dòng)物麻醉清醒后自由飲水，但禁食12～24小時(shí)后，將動(dòng)物于清醒狀態(tài)下，取背位，分別用繩子固定四肢和門(mén)齒，以控制動(dòng)物掙扎。小心分離頸前部的切口，辯認(rèn)套在頸總動(dòng)脈上的縫線(xiàn)，輕輕牽起，將線(xiàn)套收緊或者用微血管夾夾閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈。此時(shí)在2～3秒鐘內(nèi)大鼠將昏迷并喪失對(duì)光反射。缺血后2～3分鐘可出現(xiàn)異常腦電圖，并持續(xù)到缺血結(jié)束。頸總動(dòng)脈的關(guān)閉時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)而定，通常取10～20分鐘?；杳院头瓷湎侨毖欠癯晒Φ臉?biāo)志。據(jù)統(tǒng)計(jì)約有四分之三的大鼠經(jīng)上述二階段處理可導(dǎo)致缺血成功。缺血期間自主呼吸和角膜反射的存在提示腦干血液供應(yīng)的存在，這是因?yàn)榧顾枨皠?dòng)脈供血的原因。缺血結(jié)束后松開(kāi)頸總動(dòng)脈，動(dòng)物通常很快清醒。但在24～72小時(shí)內(nèi)將有一部分動(dòng)物出現(xiàn)缺血性抽搐，如果缺血持續(xù)30分鐘，在24小時(shí)內(nèi)將有20%、72小時(shí)有40%的鼠發(fā)生缺血性抽搐，這些發(fā)生抽搐的鼠在結(jié)果分析時(shí)應(yīng)被排除。
約有四分之一的鼠缺血不成功，其中2/3是昏迷不完全，另外1/3死于呼吸衰竭。該模型的制作的關(guān)鍵是燒灼椎動(dòng)脈，由于椎動(dòng)脈不能直接看到，這就需要操作者具有一定的經(jīng)驗(yàn)，適當(dāng)?shù)恼莆諢频臅r(shí)間和電極與翼孔的角度，同時(shí)要避免損傷腦干。
4.大腦中動(dòng)脈結(jié)扎模型的制作
結(jié)扎大腦中動(dòng)脈（MCA）是制作局灶性腦缺血模型的常用方法，早期大多用較大的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（貓、狗）制作，近年來(lái)用大鼠制作的大腦中動(dòng)脈結(jié)扎模型已被大家接受并得到廣泛的應(yīng)用。目前比較標(biāo)準(zhǔn)的模型是Tamura 1981年報(bào)道的方法[5]。他們于近側(cè)段結(jié)扎SD大鼠的大腦中動(dòng)脈，并詳細(xì)比較了結(jié)扎后腦血流改變和組織病理學(xué)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié)扎后4小時(shí)產(chǎn)生較為恒定的紋狀體和皮質(zhì)損害的腦血流（CBF）閾值是25ml/100g/min，這一閾值明顯較貓、猴要高。具體操作程序是：動(dòng)物麻醉下，頭皮切口，分離顳肌，取外眥和外耳門(mén)連線(xiàn)的中點(diǎn)，用牙科鉆或環(huán)形顱鉆鉆開(kāi)顱骨、暴露大腦中動(dòng)脈，于手術(shù)顯微鏡下辯認(rèn)大腦中動(dòng)脈及其分枝，在分枝的下方即MCA的近段，分離結(jié)扎或燒灼MCA，同時(shí)取頸部切口分離結(jié)扎同側(cè)的頸總動(dòng)脈。在分離結(jié)扎或燒灼MCA時(shí)，應(yīng)避免損傷附近的腦組織，通常用鈍頭的直角鉤子固定于定位儀上，操縱定位儀旋鈕，輕輕地將MCA提起，然后燒灼或結(jié)扎。該模型操作的關(guān)鍵有兩點(diǎn)：(1)**的定位結(jié)扎部位，一定要在MCA的豆紋動(dòng)脈分枝的下方，如果在其上方結(jié)扎將很少出現(xiàn)皮質(zhì)和基底節(jié)梗塞灶。但是在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)往往不能辯認(rèn)出MCA的分支，此時(shí)可以嗅溝為標(biāo)志，在其以下進(jìn)行結(jié)扎；(2)同側(cè)頸總動(dòng)脈的長(zhǎng)久結(jié)扎，能夠加重MCA供血區(qū)的缺血程度，是恒定的腦梗塞出現(xiàn)的必要條件，有時(shí)甚至配以暫時(shí)的對(duì)側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎。
該法的優(yōu)勢(shì)是病理生理變化接近人類(lèi)的MCA栓塞，經(jīng)改進(jìn)后也可進(jìn)行重灌流研究。其缺點(diǎn)是開(kāi)顱破壞了顱內(nèi)壓的恒定，擾亂了腦脊液循環(huán)的動(dòng)力學(xué)，并易致**侵入，從而影響組織病理學(xué)評(píng)價(jià)。此外，附著在MCA上交感神經(jīng)纖維可因結(jié)扎或電凝而損傷，使血管的自調(diào)節(jié)功能受損。
5、腦缺血模型的測(cè)量指標(biāo)
用于腦制備評(píng)價(jià)的測(cè)量指標(biāo)很多，包括行為學(xué)、組織病理學(xué)、生物化學(xué)、生理學(xué)和分子生物學(xué)。具體地如何選擇評(píng)價(jià)指標(biāo)要根據(jù)實(shí)驗(yàn)者的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)者所要試驗(yàn)的假說(shuō)來(lái)決定。一般的指標(biāo)有死亡率、神經(jīng)病學(xué)缺失、行為學(xué)損害、組織病理學(xué)損害等等。1. 死亡率是一個(gè)比較簡(jiǎn)便的指標(biāo)，在研究**療效時(shí)有一定的作用，但對(duì)于腦缺血操作機(jī)制的研究所提供的信息非常有限；2. 神經(jīng)病學(xué)缺失的記分方法：這是模擬人類(lèi)卒中后的臨床癥狀進(jìn)行評(píng)分，但在實(shí)際應(yīng)用中其指標(biāo)變異太大且客觀性不夠，應(yīng)用受到限制。例如大腦中動(dòng)脈結(jié)扎后是否出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)損害更多的是決定于缺血是否累及內(nèi)囊而與梗塞灶的大小關(guān)系不大。常用大腦中動(dòng)脈結(jié)扎后的神經(jīng)缺失評(píng)價(jià)為5級(jí)記分法：無(wú)神經(jīng)缺失記為0級(jí)；對(duì)側(cè)前肢不能充分伸直，顯示輕度局灶性神經(jīng)病缺失記為1級(jí)；2級(jí)為中度局灶性神經(jīng)損害，動(dòng)物向?qū)?cè)、旋轉(zhuǎn)；顯示嚴(yán)重的局灶性神經(jīng)損害為3級(jí)，動(dòng)物倒向?qū)?cè)；4級(jí)損害是不能自發(fā)行走，并伴有不同程度的意識(shí)障礙；3. 復(fù)雜的行為學(xué)指標(biāo)對(duì)評(píng)價(jià)缺血損傷有一定的作用。如逃避反射的跳臺(tái)試驗(yàn)、Y型迷宮和Morris水迷宮等，但這類(lèi)指標(biāo)要求較高，需對(duì)研究人員和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行專(zhuān)門(mén)的訓(xùn)練，花費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)。許多研究人員選擇更為客觀的測(cè)量指標(biāo)，如CBF、腦的糖代謝和組織病理學(xué)觀察。要注意的是這類(lèi)指標(biāo)的腦區(qū)間的差異較大，需同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)分析。在上述指標(biāo)中評(píng)價(jià)缺血性損害的金標(biāo)準(zhǔn)（gold standard）是組織病理學(xué)觀察。例如大腦中動(dòng)脈結(jié)扎后，用腦梗塞灶體積的大小、半影區(qū)的大小來(lái)評(píng)價(jià)缺血損害的程度。全腦缺血模型鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞丟失的數(shù)量，或者紋狀體內(nèi)神經(jīng)元死亡的數(shù)量來(lái)評(píng)價(jià)全腦一過(guò)性缺血損害的程度和某些**的**效果。
