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構(gòu)菌菌絲酒提物的藥效學(xué)研究
日期：2024-12-07 15:02
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摘要：
構(gòu)菌菌絲酒提物的藥效學(xué)研究
摘要: 用東莨菪堿造成小鼠記憶獲得障礙或用亞硝酸鈉破壞小鼠記憶鞏固, 用明暗箱法來(lái)觀察菌絲酒提物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用; 用斷頭喘息法觀察菌絲酒提物的抗氧化作用; 用游泳法觀察菌絲酒提物的抗疲勞作用。結(jié)果顯示, 小鼠灌胃菌絲酒提物能明顯延長(zhǎng)避暗實(shí)驗(yàn)中記憶障礙小鼠從明場(chǎng)進(jìn)入暗場(chǎng)的潛伏期, 減少錯(cuò)誤次數(shù); 能顯著延長(zhǎng)小鼠斷頭喘息時(shí)間和小鼠在冷水中的游泳時(shí)間。說(shuō)明菌絲酒提物具有較強(qiáng)的改善小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙、抗氧化作用和抗疲勞作用。
關(guān)鍵詞: 菌絲酒提物; 學(xué)習(xí)記憶; 抗氧化; 抗疲勞
食用菌 , 素有“素中之葷”的美稱 , 不僅有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值 , 而且還有很高的藥用價(jià)值[1 ]。構(gòu)菌是藥食兩用菌 , 俗稱增智菇。我所生物合成室多年來(lái)在對(duì)多種構(gòu)菌菌株進(jìn)行篩選的基礎(chǔ)上優(yōu)選出的具有高產(chǎn)和顯著生物活性的菌株 , 我所植化室對(duì)發(fā)酵物進(jìn)行了分離提取 , 我們對(duì)其中的一個(gè)提取物 - 菌絲酒提物進(jìn)行了一系列的藥效學(xué)研究 , 以開(kāi)發(fā)其藥用價(jià)值。
1 材料
111 動(dòng)物 ICR小鼠 , 18 - 22g , 雄性。
112 菌絲酒提物的制備 發(fā)酵菌絲用 70 %乙醇提取 , 得到菌絲酒提物。臨用前用生理鹽水 (NS) 配制成濃度為 (小) 015g/ kg、 (中) 1g/ kg、 (大)115g/ kg三個(gè)濃度。按011ml/ 10g體重給藥。
113 試劑及儀器 氫溴酸東莨菪堿; 亞硝酸鈉 (NaNO2); 多萘哌齊 (DO) 。明 暗 箱。
2 方法與結(jié)果
211 菌絲酒提物對(duì)東莨宕堿致小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的影響 ICR小鼠 60 只 , 體重 18 - 22g , 雄性 , 實(shí)驗(yàn)前在本實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)兩天以適應(yīng)環(huán)境。實(shí)驗(yàn)時(shí)隨機(jī)分為6組 , 每組10只。設(shè)正常對(duì)照組 (NS) 、模型對(duì)照組、菌絲酒提物 015g/ kg 組、菌絲酒提物 1g/kg組、菌絲酒提物115g/ kg組和陽(yáng)**對(duì)照組 (多萘哌齊3mg/ kg) , 均灌胃給藥。**天下午給受試**一次 , **天學(xué)習(xí)前先給受試** , 30min 后除正常對(duì)照組外 , 每組小鼠腹腔注射東莨菪堿1mg/ kg , 30min后將小鼠放進(jìn)明暗箱中先適應(yīng)環(huán)境3min , 然后給定電壓為 36V , 進(jìn)行學(xué)習(xí) 5min , 下午再給一次藥。第三天先給一次藥 , 30min 后進(jìn)行記憶測(cè)試 , 記錄小鼠**次進(jìn)入暗箱的潛伏期及5min內(nèi)進(jìn)入暗箱的次數(shù) (或稱錯(cuò)誤次數(shù)) 。結(jié)果見(jiàn)表1。模型組與正常對(duì)照組比 , 小鼠**次進(jìn)入暗場(chǎng)的潛伏期明顯縮短 ( P < 01001) , 錯(cuò)誤次數(shù)明顯增多 (P < 0101) , 給藥組與模型組相比 , 菌絲酒提物015g/ kg、1g/ kg、115g/ kg劑量組均能明顯延長(zhǎng)小鼠**次進(jìn)入暗場(chǎng)的潛伏期 , 呈量效關(guān)系 , 1g/ kg和115g/ kg劑量組能明顯減少錯(cuò)誤次數(shù) (P < 0105) 。由小鼠**次進(jìn)入暗場(chǎng)的潛伏期結(jié)果計(jì)算得到菌絲酒提物 015g/ kg、1g/ kg和 115g/ kg劑量組對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的改善率分別為5915 %、7918 %和9116 %。
212 對(duì)亞硝酸鈉造成小鼠記憶鞏固障礙的影響
分組、給藥同 211 項(xiàng) , **天學(xué)習(xí)前先給受試** , 30min后除正常對(duì)照組外 , 每組小鼠皮下注射亞硝酸鈉120mg/ kg , 30min后將小鼠放進(jìn)明暗箱中學(xué)習(xí) , 24h后進(jìn)行記憶測(cè)試。結(jié)果見(jiàn)表 2。與模型組相比 , 菌絲酒提物 1g/ kg和 115g/ kg劑量組均能明顯延長(zhǎng)小鼠**次進(jìn)入暗場(chǎng)的潛伏期 (P < 0105和 P < 0101) , 115g/ kg劑量組與多萘哌齊組小鼠**次進(jìn)入暗箱的潛伏期都超過(guò)了正常對(duì)照組。1g/kg和 115g/ kg 劑量組能明顯減少錯(cuò)誤次數(shù) ( P <0105) 。菌絲酒提物 015g/ kg、1g/ kg和 115g/ kg劑量組小鼠的記憶改善率分別為 5614 %、7713 %和11618 %。
213 對(duì)小鼠斷頭喘息的影響 ICR小鼠 40 只 , 體重18～22g , 雄性 , 隨機(jī)分為 4 組 , 每組 10 只。設(shè)正常對(duì)照 NS組、菌絲酒提物 015g/ kg 組、菌絲酒提物1g/ kg組和菌絲酒提物 115g/ kg組 , 均皮下注射給藥。小鼠皮下注射** 30min后 , 用剪刀迅速剪下小鼠頭部 , 立即計(jì)時(shí) , 記錄小鼠頭部脫離身體后張口喘息的時(shí)間。結(jié)果見(jiàn)表 3。小鼠被斷頭后菌絲酒提物組 1g/ kg 和 115g/ kg 與正常對(duì)照組比較 ,其喘息時(shí)間分別延長(zhǎng)了4118 %和7217 % , 均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P < 01001) 。菌絲酒提物 015g/ kg與正常對(duì)照組相比其喘息時(shí)間延長(zhǎng)了 612 % , 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P < 0105) 。
214 抗疲勞作用 分組、給藥同 213 項(xiàng) , 灌胃給藥。桶中放入19cm深的水 , 再用冰調(diào)節(jié)水溫度至19℃。給藥 30min 后 , 觀察其在水中的游泳 (存活) 時(shí)間。結(jié)果見(jiàn)表 4。灌胃菌絲酒提物 015g/ kg、1g/ kg和115g/ kg 與正常對(duì)照組比較 , 游泳時(shí)間分別延長(zhǎng)了3215 %、6419 %和9714 % , 均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P < 0105) 。
3 討論
回避性條件反射方法已得到廣泛應(yīng)用, 但正常動(dòng)物經(jīng)一次訓(xùn)練即可學(xué)會(huì)逃避電擊, 且很快趨于鞏固,維持相當(dāng)一段時(shí)間。在這種情況下觀察**增強(qiáng)正常動(dòng)物記憶的作用是困難的。采用記憶缺失的動(dòng)物模型, 觀察**改善動(dòng)物記憶障礙的作用, 不但有助于評(píng)定**的作用, 且可初步分析**的作用機(jī)制[2]。東莨菪堿造成小鼠記憶獲得障礙和亞硝酸鈉造成小鼠記憶鞏固障礙是國(guó)內(nèi)外經(jīng)常使用的較為成熟的模型,避暗法也是研究學(xué)習(xí)記憶的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法。**影響記憶可能有兩種形式: ①**改變一般機(jī)能狀態(tài)而影響記憶; ②**作用于與記憶有關(guān)的神經(jīng)結(jié)構(gòu), 易化記憶過(guò)程[3]。已有研究表明, 東莨菪堿是M- 膽堿能受體阻滯劑, 亞硝酸鈉是致腦缺氧劑。膽堿能路徑是記憶的內(nèi)在基礎(chǔ), 腦部缺氧可破壞記憶的保持[4]。因此我們采用上述模型來(lái)觀察菌絲酒提物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的作用。本研究結(jié)果提示, 菌絲酒提物015～115g/ kg對(duì)東莨菪堿造成的記憶獲得障礙及亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙都有較明顯的改善作用,且此作用有量效關(guān)系。劑量越大, 作用越明顯。說(shuō)明菌絲酒提物可能具有膽堿能樣作用, 尚需進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明。斷頭喘息實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示, 菌絲酒提物可促進(jìn)需氧代謝, 改善腦缺氧, 為菌絲酒提物可改善亞硝酸鈉造成的記憶鞏固障礙提供了一個(gè)理論依據(jù); 游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示, 菌絲酒提物有抗疲勞和抗寒冷作用, 其作用機(jī)制正在研究中。
