摘要: 目的　研究鹽附子(SAC)對(duì)小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的急性毒性作用。方法　采用小鼠自發(fā)活動(dòng)、爬桿、Morris水迷宮試驗(yàn),分別設(shè)SAC生藥7. 68、3. 84、1. 92g·kg- 1劑量組, ig給藥,同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照組。單次給藥后15、60min用自發(fā)活動(dòng)儀測(cè)定小鼠在10min內(nèi)自發(fā)活動(dòng)的次數(shù);單次給藥30min后將小鼠放在爬桿架的玻璃棒上,記錄小鼠爬桿時(shí)間;連續(xù)給藥4d,末次給藥后30min進(jìn)行水迷宮試驗(yàn),以小鼠找到隱藏平臺(tái)的時(shí)間為逃避潛伏期。結(jié)果　SAC高、中、低劑量組的小鼠自發(fā)活動(dòng)次數(shù)、爬桿時(shí)間、逃避潛伏期與對(duì)照組相應(yīng)指標(biāo)相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0. 05)。結(jié)論　SAC濃度為7. 68、3. 84、1. 92g·kg- 1時(shí),未觀察到其對(duì)小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的急性毒性作用。

關(guān)鍵詞:鹽附子; 自發(fā)活動(dòng)次數(shù); 爬桿時(shí)間; 逃避潛伏期; 神經(jīng)毒性

　附子Aconitumcarmichaeli為毛莨科植物烏頭子根的加工品,因其附生烏頭得名。附子的毒性成份為烏頭堿,可溶于水與乙醇,毒性極大,人口服0. 2mg即可產(chǎn)生中毒癥狀,其結(jié)晶2～4mg即可致死。鹽附子是泥附子經(jīng)丹巴液鹽浸、曬晾炮制加工而成,是臨床上常用附子的炮制品。為其臨床的**用藥提供依據(jù),特選用小鼠自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)、爬桿試驗(yàn)、Morris水迷宮試驗(yàn),研究了鹽附子的急性神經(jīng)毒性。

1　實(shí)驗(yàn)部分

111　試藥、儀器與動(dòng)物鹽附子(SAC,生藥1. 09 g·ml- 1)為深褐色液體,由泥附子經(jīng)鹽浸炮制加工而成;***注射液(天津金耀氨基酸有限公司, 5mg·ml- 1);氫溴酸東莨菪堿注射液(上海禾豐制藥有限公司0. 3mg·ml- 1)。JXDH- Ⅰ自發(fā)活動(dòng)儀(河北冀星試驗(yàn)儀器公司);Morris水迷宮系統(tǒng)(北京新天地科技有限公司);小鼠爬桿架(自制)。普通級(jí)健康成年昆明種小鼠[四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專委會(huì)養(yǎng)殖場(chǎng),生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(川)2004- 014]共150只,體重20～26g,♀♂兼用。小鼠飼養(yǎng)于中心的普通級(jí)小動(dòng)物房,每籠5只,溫度20℃～26℃,濕度55%±15%,照明時(shí)間12h/12h。將小鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組和鹽附子高、中、低劑量組。112　統(tǒng)計(jì)方法

結(jié)果用x±s表示,各組數(shù)據(jù)用SPSS11. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析。

1. 3　方法與結(jié)果

11311　自發(fā)活動(dòng)試驗(yàn)　小鼠50只,隨機(jī)均分為5組。SAC高、中、低劑量組小鼠分別ig生藥7168、3184、1192g·kg- 1陰性對(duì)照組給予蒸餾水;陽(yáng)性對(duì)照組給予***注射液5mg·kg

- 1。分別于給藥后15、60min測(cè)定小鼠10min內(nèi)自發(fā)活動(dòng)的次數(shù)[1]。表1結(jié)果顯示, SAC高、中、低劑量組小鼠的自發(fā)活動(dòng)次數(shù)與相應(yīng)的陰性對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0. 05)。SAC高劑量組小鼠與中、低劑量組的比較有所減少,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。11312　爬桿實(shí)驗(yàn)　按“1. 3. 1”項(xiàng)方法分組、給藥。試驗(yàn)前訓(xùn)練小鼠兩天,使其學(xué)會(huì)爬桿。給藥30min后,將小鼠放在爬桿架的玻璃棒上,使肌肉處于靜力緊張狀態(tài),記錄小鼠由于肌肉疲勞從棒上跌落的時(shí)間,累計(jì)3次的爬桿時(shí)間作為總的爬桿時(shí)間。SAC高、中、低劑量組小鼠的爬桿時(shí)間與相應(yīng)的陰性對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0. 05)。SAC高劑量組小鼠與中、低劑量組的比較有所減少,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

11313　Morris水迷宮試驗(yàn)　將Morris水迷宮分為四個(gè)象限,平臺(tái)置**象限離水面約1cm處。先將小鼠放在平臺(tái)上使其熟悉平臺(tái)30 s,再將小鼠從與平臺(tái)相對(duì)的象限面壁放入迷宮,以小鼠找到隱藏平臺(tái)的時(shí)間為逃避潛伏期。若120 s小鼠仍找不到平臺(tái),則引導(dǎo)小鼠至平臺(tái)上,逃避潛伏期計(jì)為120 s。重復(fù)測(cè)定1次,取其平均值。除陽(yáng)性對(duì)照組ip氫溴酸東莨菪堿注射液3mg·

kg- 1外,其余按“1. 3. 1”項(xiàng)方法分組、給藥,各組均連續(xù)給藥4 d。每次給藥后30min進(jìn)行水迷宮試驗(yàn),取第4天的結(jié)果為正式試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果顯示, SAC高、中、低劑量組小鼠的逃避潛伏期與相應(yīng)陰性對(duì)照組的比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0. 05)。

2　討論

附子具有強(qiáng)心、**、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、調(diào)節(jié)**功能等作用,但又是常見(jiàn)的有毒中藥之一。其主要毒性成分為脂溶性二脂類生物堿,毒性表現(xiàn)為神經(jīng)和心血管系統(tǒng)的嚴(yán)重?fù)p害。鹽附子、黑順片、白附片是臨床上常用附子的炮制品,其中又以鹽附子*為常用,故文中選用鹽附子來(lái)研究其急性神經(jīng)毒性。鹽附子是附子的粗加工品,其毒性和藥理作用與生附子相比變化不大,故文中試驗(yàn)結(jié)果也反映了生附子的急性神經(jīng)毒性。實(shí)驗(yàn)采取神經(jīng)行為測(cè)試組合來(lái)研究鹽附子對(duì)小

鼠神經(jīng)行為功能的影響。給藥組與陰性對(duì)照組比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但鹽附子高劑量組小鼠自發(fā)活動(dòng)次數(shù)和爬桿時(shí)間與其他組比較均有所減少,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？赡茉蚴躯}附子急性神經(jīng)毒性較低,短期給藥對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)次數(shù)和爬桿時(shí)間影響較小,故在較高的生藥劑量下才出現(xiàn)較小的毒性。試驗(yàn)結(jié)果顯示,鹽附子生藥濃度為7168、3184、1192g·kg- 1時(shí),未觀察到其對(duì)小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的急性毒性作用。