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低氧及運動致大鼠骨骼肌形態(tài)學改變的實驗研究
【摘要】目的 觀察低氧及低氧復(fù)合運動時 大鼠體重及腓腸肌顯微、超微結(jié)構(gòu)的變化,旨在探討低氧狀態(tài)下適當運動對骨骼肌的影響。 方法 建立大鼠低氧及低氧復(fù)合運動模型,運用光鏡及透射電鏡觀察大鼠腓腸肌顯微、超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果 低氧復(fù)合運動組較低氧安靜組大鼠體重差異有顯著性意義()。低氧復(fù)合運動組骨骼肌結(jié)構(gòu)正常 線粒體數(shù)量增加,骨骼肌纖維增粗****增生。 結(jié)論 低氧復(fù)合適當?shù)倪\動能夠維持骨骼肌的正常形態(tài) 增強骨骼肌的有氧代謝 起到保護骨骼肌的作用,從而提高骨骼肌的低氧適應(yīng)能力,促進低氧習服。
【關(guān)鍵詞】低氧 運動 骨骼肌 顯微結(jié)構(gòu) 超微結(jié)構(gòu)初次進入高原低氧地區(qū),由于整體或局部的缺氧會引起機體出現(xiàn)一系列反應(yīng),如急性高原反應(yīng)。如何*大限度地減輕高原反應(yīng),提高初入高原者的勞動、訓(xùn)練能力,是高原醫(yī)學研究的重要課題。有研究顯示 ,適當體育鍛煉可以促進高原習服,其表現(xiàn)為增強心、肺功能,改善機體對氧的攝取、運輸和利用,提高機體*大用氧能力。本實驗通過觀察低氧及低氧復(fù)合運動時 大鼠體重及腓腸肌顯微、超微結(jié)構(gòu)的變化,旨在探討低氧狀態(tài)下適當運動對骨骼肌的影響。
材料與方法
一、實驗材料
動物及分組: ( )雄性大鼠只由南方醫(yī)科大學實驗動物中心提供,周齡,體質(zhì)量 。隨機分為四組: 組,正常氧安靜組(只);組,正常氧運動組( 只);組,低氧安靜組( 只);組,低氧運動組( 只)。主要試劑及儀器:常壓低氧帳篷系統(tǒng)(美國公司), 型電動動物跑臺兩部(杭州立泰科技有限公司), 透射電鏡(日本電子),電子天平( )。
二、實驗方法
動物模型:采用常壓低氧帳篷系統(tǒng),模擬氧含量 (相當于海拔 ),其中、兩組動物
每天: :置入低氧帳篷內(nèi)。實驗用 型電動動物跑臺兩部,該跑臺可自動記錄大鼠訓(xùn)練時
間,運動距離和跑動速度,裝備有光、電、聲刺激裝置,、兩組大鼠每天在跑臺上訓(xùn)練 ,跑臺速度設(shè)定為 。組大鼠在正常條件下飼養(yǎng),不施加任何處理因素。
取材:于實驗開始后第、、、天在各組動物中隨機抽取 只,稱重, 水合氯醛溶液腹腔內(nèi)麻
醉。迅速完整切除左側(cè)腓腸肌。光鏡切片的制備:取 左右的骨骼肌組織方塊,經(jīng) 福爾馬林固定后,常規(guī)石蠟包埋,切片。 切片常規(guī)用二甲苯脫蠟,經(jīng)各級乙醇至水洗:二甲苯( ) 二甲苯 乙醇蒸餾水洗 。蘇木素染色 ,自來水洗。 鹽酸乙醇分化 (提插數(shù)下)。 自來水浸
泡 。置伊紅液 。常規(guī)脫水,封片:二甲苯 中性樹脂封固。電鏡超薄切片的制備:取上述骨骼肌組織少許用于制備電鏡超薄切片標本。 銳利眼科剪將標本剪成 左右的骨骼肌組織方塊。 肌肉組織投入含 戊二醛專用電鏡固定液的小瓶中固定。 用 緩沖液洗 次。 鋨酸
后固定 。 常規(guī)電鏡樣品制備程序脫水、滲透、包埋、超薄切片、鈾鉛染色。 透射電鏡觀察。
三、統(tǒng)計學分析
應(yīng)用 軟件對每組結(jié)果進行檢驗,結(jié)果以 表示。 差異有顯著性意義。
結(jié) 果
大鼠體重:從表 可以看出,伴隨時間的增加,各組大鼠體重隨時間的改變差異有顯著性意義;低氧安靜組大鼠體重降低與其它組比較差異有顯著性意義,慢性低氧尤為明顯。運動可以促進大鼠體重增加,甚至可對抗低氧造成的體重減輕,并且這種改變超過常氧安靜組大鼠自然體重的增加,與同樣運動量的常氧運動組大鼠相比較稍有減少,但差異無顯著性意義。低氧條件下適當?shù)倪\動,可以增加機體對低氧的習服能力。
討 論
高原環(huán)境影響人體的主要因素是低氧。平原人進入高原后,機體在神經(jīng)體液調(diào)節(jié)下發(fā)生一系列的代償適應(yīng)性變化,以適應(yīng)高原環(huán)境,這個過程稱之為習服。由于個體的差異,每個人的習服能力不一樣。大多數(shù)平原人進入高原后,通過機體的代償適應(yīng)性反應(yīng)可以獲得對高原環(huán)境的良好習服,能夠在高原環(huán)境中正常工作、生活而無任何不適。但也有一部分人,從平原
進入高原后,由于代償適應(yīng)性反應(yīng)不足或過于強烈而發(fā)生習服**,從而出現(xiàn)各種急、慢性高原病。如何提高勞動者的低氧適應(yīng)能力和高原保健水平,提高高原**的作戰(zhàn)能力和運動員的訓(xùn)練成績,有效的干預(yù)低氧對人體損害具有重要意義。維持骨骼肌正常的結(jié)構(gòu)和功能對提高高原勞動能力具有重要作用。本實驗研究結(jié)果顯示:在單純低氧情況下大鼠表現(xiàn)出種種不適應(yīng)現(xiàn)象如體重降低,肌纖維明顯萎縮,急性期骨骼肌線粒體體積增大,嵴稍腫脹、嵴內(nèi)腔擴大,嵴紊亂,高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稍腫大,細血管形成可縮短氧從****向組織細胞彌散的距離改善組織的供氧是機體在局部組織水平上對低氧習服的重要機制之一。
在單純低氧條件下骨骼肌纖維明顯萎縮,這對于處在低氧條件下的機體減少局部氧耗、保持主要器官的能量代謝具有一定的代償適應(yīng)意義。骨骼肌萎縮可能與低氧時骨骼肌的氧供減少、合成代謝降低以及低氧時動物活動量減少所致的功能性“廢用”有關(guān)。單純低氧時骨骼肌****增生與否一直存有爭議。早期的研究發(fā)現(xiàn)動物生活在高原環(huán)境中****密度增加從而推斷有****增生 。但 等提出低氧時骨骼肌****密度增加是由于骨骼肌纖維的萎縮所致。該觀點被隨后的一些實驗所肯定。血管密度增加但由于骨骼肌纖維的萎縮使單位面積內(nèi)****數(shù)與肌纖維數(shù)的比值 不變。說明在低氧安靜條件下****數(shù)目無明顯增加。但由于肌纖維的萎縮、變細 ****密度增加使氧的彌散距離縮短從而有利于骨骼肌組織氧的供應(yīng)。這可能是低氧時骨骼肌組織對低氧習服適應(yīng)的特點。低氧復(fù)合適當運動時 骨骼肌肌纖維不發(fā)生萎縮并且出現(xiàn)新生****以此來適應(yīng)骨骼肌功能增強的需要。機體在低氧復(fù)合運動的初期骨骼肌氧的供需比值失衡可能是引起骨骼肌****增生的基礎(chǔ)。而低氧安靜時由于紅細胞數(shù)增加使氧供相對增多機體的活動量減少及肌纖維萎縮使骨骼肌對氧的需求相對減少這樣氧的供 需失衡現(xiàn)象并不明顯因此****不增生。有研究表明在低氧復(fù)合適當運動的大鼠骨骼肌****在增生的同時 血管內(nèi)皮生長因子()表達量顯著增加而低氧安靜大鼠骨骼肌****并沒有增生 的量也沒見明顯變化。低氧復(fù)合運動引起骨骼肌****增生的機制可能與低氧復(fù)合運動時低氧誘導(dǎo)因子()表達增加有關(guān)。 作為調(diào)節(jié) 的轉(zhuǎn)錄因子,直接從基因水平調(diào)節(jié) 在組織中的表達。 能增加血管尤其是微小血管的滲透性,使血漿大分子外滲。通過與血管內(nèi)皮細胞表面的特異性受體結(jié)合而明顯促進成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞生長,合成和分泌膠原等細胞外基質(zhì),并能強烈促進新血管形成,是生理條件下和病理生理適應(yīng)過
程中血管生長的主要調(diào)節(jié)因子 。低氧復(fù)合運動能夠通過 表達的增加來提高 在組織中的表
達,從而促進新血管形成。
綜上所述,我們認為低氧復(fù)合適當?shù)倪\動能夠維持機體的正常重量,穩(wěn)定骨骼肌的正常結(jié)構(gòu)增加線粒體數(shù)量,抑制骨骼肌萎縮并且能夠促使骨骼肌****新生改善骨骼肌的血液供應(yīng)有利于骨骼肌的有氧代謝促進機體對高原低氧環(huán)境的習服。