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復(fù)方紅景天對(duì)大強(qiáng)度訓(xùn)練大鼠**功能的調(diào)節(jié)作用
摘 要 目的:探討中醫(yī)藥提高運(yùn)動(dòng)成績(jī)、減輕過度訓(xùn)練引致的機(jī)體**力下降的作用機(jī)制。方法:50只大鼠隨機(jī)分成3組,進(jìn)行相應(yīng)的跑臺(tái)訓(xùn)練和測(cè)試。結(jié)果:大強(qiáng)度訓(xùn)練大鼠脾細(xì)胞抗體形成能力下降、白細(xì)胞移動(dòng)抑制指數(shù)升高,且其血漿ACTH和β-EP的含量低于非訓(xùn)練對(duì)照組動(dòng)物。而進(jìn)行大強(qiáng)度訓(xùn)練的同時(shí)服用復(fù)方紅景天的中藥組動(dòng)物的上述指標(biāo)均有改善趨勢(shì)。結(jié)論:復(fù)方紅景天能提高大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)大鼠的運(yùn)動(dòng)能力及改善其**功能的作用可能是通過影響神經(jīng)*****網(wǎng)絡(luò)實(shí)現(xiàn)的。
The regulation of Rhodiola Crenulata Compound on immune function of rats trained by heavy exercise
SHI Jian-Rong,ZHUANG Jian-Qing,GUO Rui-Xin et al. Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 200032
Abstract Objective:In order to study the effect of TCM on decreased immune function of the body after heavy exercise(HE) training.Methods:50 rats were divided into three groups in the experiment.Results:A decline in the ability of antibody forming of spleen cells and an increase of the inhibitor moving index of white cells were observed in the rats after heavy exercise training. Meanwhile the contents of ACTH and β-EP in the plasma of the HE rats were lower than that of the normal control.In the group of TCM+HE,the rats were received Rhodiola Crenulata Compound and forced heavy exercise,the above index were improved.This results indicated that this compound was effective in the exercise performance and could enhance immune function of the HE training rats.Conclusion:The effects of the neuroendocrine-immune regulatory circuit were believed to be the possible mechanism for explaining the effect of this compound on promoting the immune function on the rats with heavy exercise training.
Key words Heavy exercise training Immune function Neuroendocrine-immune Rhodiola Crenulata Compound
適度的運(yùn)動(dòng)可增強(qiáng)機(jī)體**力,而過度或激烈運(yùn)動(dòng)則會(huì)降低機(jī)體**力。對(duì)運(yùn)動(dòng)員來說,平時(shí)大強(qiáng)度的訓(xùn)練和賽期激烈的比賽又是不可避免的,故常發(fā)現(xiàn)一些運(yùn)動(dòng)員在訓(xùn)練比賽后,機(jī)體抵抗力下降,容易感染**,以致影響他們的運(yùn)動(dòng)能力,甚至停止參加比賽[1]。因此,如何減輕過度訓(xùn)練引致的機(jī)體**力下降、提高運(yùn)動(dòng)成績(jī)成了研究熱點(diǎn)。中醫(yī)藥為研究解決上述問題提供了新的途徑。本課題觀察了大鼠大強(qiáng)度訓(xùn)練模型的**功能變化及中藥復(fù)方紅景天對(duì)該模型大鼠**功能的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 復(fù)方紅景天煎劑的制備 將紅景天、黃芪、白術(shù)、麥冬等(由上海市藥材公司提供)中藥按比例配好,溫浸2 h后水煎,濃縮為1.78 g生藥/ml。
1.2 動(dòng)物分組及給藥 將50只體重190 g左右(3月齡)純種SD雄性大鼠(由上海醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)進(jìn)行跑臺(tái)適應(yīng)性訓(xùn)練,剔除不會(huì)跑、不愿跑的,篩選出37只大鼠,隨機(jī)分成3組:非訓(xùn)練對(duì)照(Normal control)組,7只動(dòng)物,大強(qiáng)度訓(xùn)練(Heavy exercise,HE)組,15只動(dòng)物,中藥(TCM+HE)組,15只動(dòng)物。中藥組通過灌胃給藥,給藥量為10 ml/kg體重,每日分2次灌胃。非訓(xùn)練對(duì)照組與大強(qiáng)度訓(xùn)練組動(dòng)物以水代藥,每天亦灌胃2次。根據(jù)量效關(guān)系的預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn),中藥的*佳用量相當(dāng)于臨床**用量的25倍。
1.3 跑臺(tái)訓(xùn)練方法 非訓(xùn)練對(duì)照組動(dòng)物自由生活在籠內(nèi),不施加運(yùn)動(dòng)負(fù)荷。大強(qiáng)度訓(xùn)練組及中藥組大鼠用國產(chǎn)電動(dòng)鼠類跑臺(tái)進(jìn)行訓(xùn)練[2],每周訓(xùn)練6 d。第1周以15 m/min的速度,每天訓(xùn)練10 min;第2周跑速為20 m/min,跑時(shí)從每日10 min起增至每日60 min;第3周前3日速度為30 m/min,時(shí)間為60 min,后3日跑速不變,跑時(shí)每日增加10 min,從70 min/d增至90 min/d;第4周至第8周,均以30 m/min的速度訓(xùn)練90 min。訓(xùn)練過程中,由于動(dòng)物腳傷或不明原因的不愿跑,又淘汰9例,到第8周結(jié)束時(shí),大強(qiáng)度訓(xùn)練組為10只大鼠,中藥組為11只大鼠。
1.4 跑步成績(jī)測(cè)試 第8周的第1天,大強(qiáng)度訓(xùn)練組和中藥組大鼠在固定速度為40 m/min的情況下跑步,以大鼠竭盡全力所能持續(xù)的*長跑時(shí)作為跑步成績(jī)。
1.5 取樣及測(cè)試方法 8 w結(jié)束后,大強(qiáng)度訓(xùn)練組和中藥組大鼠在*后一次訓(xùn)練停止后20 h左右,用****麻醉,在上午完成取血及有關(guān)組織材料的取樣。溶血空斑試驗(yàn)(PFC)用小室液相法測(cè)定抗體形成細(xì)胞,白細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn)用毛細(xì)管法測(cè)定移
動(dòng)抑制指數(shù)(IMI),血漿ACTH及β-EP分別由上海市***研究所、**軍醫(yī)大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室檢測(cè)。
2 結(jié)果
2.1 大強(qiáng)度訓(xùn)練組與中藥組(TCM+HE)跑步成績(jī)比較 見表1。
2.2 3組大鼠白細(xì)胞移動(dòng)抑制指數(shù)、溶血空斑試驗(yàn)及血漿ACTH、β-EP的含量 見表2。
表1 大強(qiáng)度訓(xùn)練組與中藥組跑步成績(jī)比較(min)
Tab.1 The comparison of running time between the HE group and the TCM+HE group(min)
Couple of rats | Running time | HE | Difference |
TCM+HE | |||
1 | 469.6 | 321.8 | 147.8 |
2 | 330.7 | 139.5 | 191.2 |
3 | 340.0 | 159.0 | 181.0 |
4 | 299.4 | 164.3 | 135.1 |
5 | 186.2 | 135.3 | 50.9 |
6 | 164.7 | 125.0 | 39.7 |
7 | 174.9 | 186.5 | -11.6 |
8 | 278.5 | 380.8 | -102.3 |
9 | 270.9 | 213.9 | 57.0 |
10 | 136.4 | 64.2 | 72.2 |
note:t test,P<0.05,the mean:HE 189.03±95.20,TCM+HE 254.48±103.25
表2 3組大鼠白細(xì)胞移動(dòng)抑制指數(shù)、溶血空斑試驗(yàn)及血漿ACTH、β-EP的含量(±s)
Tab.2 The results of IMI,PFC and the plasma contents of ACTH and β-EP in the three group animals (±s)
Group | IMI | PFC(/106 spleen cells) | ACTH (pg/ml) | β-EP(pg/ml) |
Normal control | 0.764±0.0658 | 4.95±1.56 | 90.24±40.23 | 333.58±105.90 |
HE | 1.089±0.11811) | 3.54±0.801) | 54.69±21.831) | 212.42±81.811) |
TCM+HE | 0.739±0.519 02) | 4.11±1.342) | 65.02±41.072) | 304.33±129.772) |
note:F test,1)compared with the normal control group P<0.05,2)compared with the normal control group P>0.05
3 討論
機(jī)體**細(xì)胞存在不同遞質(zhì)和**受體,接受神經(jīng)和***系統(tǒng)的調(diào)節(jié);另外,**細(xì)胞也分泌不同遞質(zhì)、**和細(xì)胞因子對(duì)神經(jīng)、***以及**系統(tǒng)本身實(shí)現(xiàn)反饋性調(diào)節(jié),形成神經(jīng)*****網(wǎng)絡(luò)。在生理活動(dòng)情況下維持機(jī)體正常**功能。其作用是極其復(fù)雜的,如生長**對(duì)**功能具有廣泛的加強(qiáng)作用,而腎上腺糖皮質(zhì)**具有廣泛的抑制作用,ACTH及β-EP則表現(xiàn)為對(duì)**的雙重調(diào)節(jié)作用[3]。
運(yùn)動(dòng)對(duì)**功能的影響與運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度、訓(xùn)練時(shí)間有關(guān):長期適度或輕度及中度慢性運(yùn)動(dòng)對(duì)**系統(tǒng)的影響,可能是機(jī)體對(duì)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激的生理性反應(yīng)。而急性激烈運(yùn)動(dòng)和長期激烈的訓(xùn)練促進(jìn)體內(nèi)具有**抑制作用的**的釋放,抑制了機(jī)體**功能。小鼠經(jīng)過5 w較大強(qiáng)度游泳訓(xùn)練后,CD4+/CD8+細(xì)胞比值降低,T抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生增加,脾細(xì)胞對(duì)外源性IL-2的反應(yīng)能力降低,對(duì)TD抗原的二次抗體應(yīng)答受抑制,抗體產(chǎn)生水平較對(duì)照組明顯降低,這些結(jié)果表明大強(qiáng)度訓(xùn)練可引起**抑制[4]。
本實(shí)驗(yàn)用大鼠跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)模擬田徑運(yùn)動(dòng)中周期性耐力項(xiàng)目的反復(fù)超長距離跑步,造成大鼠大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)模型[2,5]。觀察到大強(qiáng)度訓(xùn)練組動(dòng)物第8周時(shí)體重(345.90±23.75 g)明顯低于非訓(xùn)練對(duì)照組(392.29±54.68 g,P<0.05),跑步持續(xù)時(shí)間的測(cè)試成績(jī)低于中藥組,PFC和IMI實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明該組動(dòng)物的體液**和細(xì)胞**水平下降,血漿中ACTH和β-EP含量均低于非訓(xùn)練對(duì)照組。一般情況下,大運(yùn)動(dòng)量后即刻測(cè)定機(jī)體血漿ACTH是升高的,本工作中所測(cè)得的ACTH的下降可能與大強(qiáng)度訓(xùn)練及取樣時(shí)間有關(guān)(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在末次運(yùn)動(dòng)20 h后取樣)。
目前認(rèn)為ACTH和β-EP是一種**系統(tǒng)內(nèi)源性調(diào)節(jié)的重要調(diào)質(zhì),二者的變化常相伴出現(xiàn)、明顯相關(guān)。不少作者認(rèn)為大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)引起β-EP增加[6],也有報(bào)道運(yùn)動(dòng)后β-EP下降[7,8],Vires認(rèn)為這些不同結(jié)果與訓(xùn)練強(qiáng)度的不一致、實(shí)驗(yàn)取樣前**的運(yùn)動(dòng)量以及機(jī)體的休息情況有關(guān)。此外,不同實(shí)驗(yàn)者在體外的關(guān)于ACTH和β-EP的**功能調(diào)節(jié)作用觀察結(jié)果有時(shí)呈相反或雙重作用,其機(jī)理尚不完全清楚[9]。
中醫(yī)的重要理論如正邪學(xué)說、陰陽學(xué)說和臟象學(xué)說中的某些論述與**學(xué)的一些基本概念有類同之處。多年的臨床實(shí)踐證明,**法能改善機(jī)體的**狀態(tài),健脾補(bǔ)氣、補(bǔ)肺**方藥等都具有提高機(jī)體**功能的作用。中藥所引起的**功能變化,不僅是作用于**系統(tǒng)的結(jié)果,還可能是通過神經(jīng)*****網(wǎng)絡(luò)所表現(xiàn)出來的總效應(yīng)[10]。
根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道和我們的調(diào)研結(jié)果:長期大強(qiáng)度訓(xùn)練的運(yùn)動(dòng)員以氣陰兩虛為主。故本實(shí)驗(yàn)中用抗疲勞、耐缺氧的具有適應(yīng)原樣作用的紅景天為主藥,并且輔以補(bǔ)氣升陽健脾**的黃芪、白術(shù)以及養(yǎng)陰生津的麥冬等,以改善大強(qiáng)度訓(xùn)練大鼠機(jī)體的功能,提高運(yùn)動(dòng)能力。其中的黃芪,它不僅能增強(qiáng)**功能,還有雙向調(diào)節(jié)作用,可以認(rèn)為是一種**調(diào)節(jié)劑。黃芪具有增強(qiáng)和調(diào)節(jié)機(jī)體**功能、提高機(jī)體抗病能力的作用是較肯定的事實(shí)。我們?cè)容^復(fù)方紅景天與單方的作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示復(fù)方提高小鼠運(yùn)動(dòng)能力的作用超過單方,說明復(fù)方加強(qiáng)**養(yǎng)陰的作用,能更好調(diào)節(jié)長期大強(qiáng)度訓(xùn)練的機(jī)體功能,在大鼠進(jìn)行大強(qiáng)度訓(xùn)練的同時(shí)服用中藥后運(yùn)動(dòng)成績(jī)提高;細(xì)胞和體液**功能以及血漿ACTH和β-EP水平與正常對(duì)照動(dòng)物無顯著性差異,說明有接近正常組動(dòng)物的趨勢(shì),推測(cè)可能與該中藥調(diào)節(jié)神經(jīng)***功能紊亂的作用有關(guān)。作者簡(jiǎn)介:施建蓉,女,35歲,碩士,副研究員,主要從事中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)研究;
莊劍青,女,47歲,碩士,副研究員,主要從事中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)研究
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〔收稿1997-03-26 二次修回1998-04-01〕