摘要　為觀察健脾**方對實驗動物學習記憶功能的影響, 采用避暗法、跳臺法和水迷路法研究健脾**方對正常
幼齡小鼠被動反應、氫溴酸東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙、****鈉所致小鼠方向辨別障礙、 400 m lö L 乙醇所致小
鼠記憶再現(xiàn)障礙的影響。結果表明: 健脾**方能減少正常幼齡小鼠 5 m in 內(nèi)學習試驗及記憶測驗的錯誤次數(shù)(P <
0105, P < 0101) , 可提高****鈉造成的方向辨別障礙模型小鼠的正確反應平均數(shù)和正確反應百分率; 亦可延長氫溴
酸東莨菪堿和乙醇所致記憶獲得與再現(xiàn)障礙模型小鼠的記憶潛伏期, 降低 5m in 內(nèi)錯誤次數(shù)(P < 0105, P < 0101)。這說
明健脾**方能增強正常動物的記憶功能, 對**所致動物記憶障礙有改善作用, 初步顯示健脾**方改善學習記憶功
能的藥理作用。
關鍵詞　健脾**方; 　學習記憶; 　記憶障礙; 　方向辨別障礙
中圖法分類號　R25613, 　R74915
Ef fects of Prescr ipt ion of Bushen-J ianp i (BSJP) on the Abil it ies
of Learn ing andM emory in M ice
Huang Guangying, L u Fuer, Yang Guang et a l
Inst itu te of In teg ra ted T rad it iona l Ch inese and W estern M ed icine,
　　　T ongj iM ed ica l U n iversity , W uhan 430030
Abstract　In o rder to ob serve the effect s of Bu shen2 J ianp i (BSJP ) on the ab ilit ies of learn ing and
m emo ry in exper im en talm ice, the test s of avo idance respon se to darkness, of sp r inging to p latfo rm af ter
elect r ic st im u lat ion and of w ater lab ryn th, in no rm al young m ice, in the m emo ry2 ob tain ing distu rbed m ice
induced by scop lam ine hydrob rom ide and in the o r ien tat ion distu rbed m ice induced by pen tobarb ital sodium
as w ell as in the m emo ry2releasing distu rbed m ice induced by 400 m lö L alcoho l, w ere respect ively per2
fo rm ed1 The resu lt s show ed that BSJP cou ld sign if ican t ly reduced the er ro r t im es w ith in 5 m in in no rm al
young m ice and in dysm nesia group s (P < 0101, P < 0105) , p ro longed the incubat ion per iods of m emo ry,
great ly imp roved the average t im es and percen tages of co r rect respon se in o r ien tat ion distu rbed m ice . It is
concluded that BSJP cou ld imp rove the m emo ry ab ilit ies bo th in no rm al and in dysm nesia m ice induced by
som e exper im en talm ater ials1 It is suggested that BSJP cou ld have the pharm aceu t ical effect s of imp roving
the ab ilit ies of learn ing and m emo ry and thu sm igh t be impo r tan t in the clin ical u se in the pat ien t sw ith de2
m en t ia1
Key words　p rescr ip t ion of Bu shen2 J ianp i ; 　ab ilit ies of learn ing and m emo ry; 　dysm nesia model an i2
m al ; o r ien tat ion distu rbance
3
國家中醫(yī)藥管理局資助項目(No. 922204)
黃光英, 女, 1945年生, 教授, 醫(yī)學博士。
　　 健脾**方主要由黃芪、人參、制首烏、枸杞子
等組成, 具有健脾**、益智醒腦等功效。本實驗觀
察健脾**方對增強正常動物記憶和改善**所致
動物記憶障礙的影響, 現(xiàn)將結果報道如下。
1　材料與方法
111　實驗動物
昆明種幼齡小鼠, 體重16～ 18 g; 昆明種8 周齡
成年小鼠, 體重 18～ 22 g, 雌雄各半, 由同濟醫(yī)科大
學實驗動物學部提供。
112　**及試劑
健脾**方浸膏(由同濟醫(yī)院藥劑科提供, 主要成分含黃芪、人參、制首烏和枸杞子等, 每 g 浸膏含
生藥 1198 g ) , 腦復康 (東北制藥廠生產(chǎn), 批號
970658) , 氫溴酸東莨菪堿(廣州僑光制藥廠生產(chǎn), 批
號 950428) , ****鈉(上?；瘜W試劑分裝廠) , 無
水乙醇(河南焦作市化工廠生產(chǎn), 批號960218)。
113　儀器
11311 小鼠避暗箱: 參照錢伯初方法[ 1 ]
改良自制而
成, 該裝置為20 cm×13 cm×35 cm 的有機玻璃箱,
分明、暗兩室, 兩間隔板底部有一直徑為 3 cm 的洞
口, 明、暗兩室底部均鋪以銅柵, 暗室底部的銅柵通
以36 V 的電流, 明室底部不通電。
11312 小鼠跳臺儀: 參照李儀奎方法[ 2 ]
改良而成, 該
裝置體積為 60 cm×12 cm×18 cm , 箱內(nèi)用有機玻
璃分隔成 5 間, 箱底鋪以銅柵, 與可調(diào)變壓器相連,
每間左后方放置一個高度和直經(jīng)均為 415 cm 的軟
木塞作為跳臺。
11313 小鼠“Y”型水迷路箱: 參照李儀奎方法[ 2 ]
改良
而成, 該裝置體積為 100 cm×19 cm×19 cm , 從中
部分支, 一側(cè)用黑色有機玻璃遮住光線, 稱為暗道,
另一側(cè)用 25W 日光燈照明, 稱為明道, 在明道上置
一平臺略高出水面。
114　學習記憶功能測定
參照文獻方法[ 2, 3 ]
, 記錄上述學習記憶實驗過程
中動物 5 m in 內(nèi)的錯誤次數(shù)和潛伏期, 后者為實驗
開始至小鼠**次錯誤的間隔時間, 與學習記憶能
力成正比。
2　結果
211　健脾**方對正常動物學習記憶功能的影響
用避暗法, 將幼齡小鼠 50 只隨機分為 5 組, 即
空白對照組、**對照組、健脾**方É、 Ê、 Ë 組。
每組 10 只, 依次分別以蒸餾水 012 m lö 10g、腦復康
液 10 gö kg、健脾**方 1112 gö kg、 2213 gö kg 和
4416 gö kg (按核算后生藥量)灌胃, 每 d 1 次, 連續(xù)
給藥14 d, 給藥結束后測定學習記憶功能(表1)。表1　健脾**方對正常幼齡小鼠被動回避反應的影響(x q±s, n= 10)
組　別 給藥量
(gö kg)
學習試驗
潛伏期( s) 錯誤次數(shù)(次)
記憶實驗
潛伏期(s) 錯誤次數(shù)(次)
空白對照組 等體積水 10116±1314 314±111 18918±5411 118±111
腦復康 1010 9213±1418 118±0183 3
22214±4517 112±0183
健脾**方É 1112 9519±2516 217±1113
22113±6912 113±1113
健脾**方Ê 2213 10311±2210 118±0173 3
25911±3618 019±0173 3
健脾**方Ë 4416 10712±3411 114±0153 3
26214±3612 017±0153 3
　　與空白對照組比較　3 P < 0105,
3 3 P < 0101
　　表 1 結果表明: 健脾**方É、 Ê、 Ë 組及腦復
康組均能明顯減少正常幼齡小鼠學習試驗及記憶測
驗的錯誤次數(shù), 提示健脾**方對正常幼齡小鼠的
學習記憶有一定的促進作用。
212　健脾**方對記憶障礙動物學習記憶功能的影響
21211 健脾**方對氫溴酸東莨菪堿所致小鼠記憶
獲得障礙的影響: 選合格昆明種小鼠 60 只, 隨機分
為 5 組, 每組 10 只, 健脾**方É、 Ê、 Ë 組劑量同
上; 空白對照組與模型組給對照液蒸餾水 012 m lö
10 g 體重, 陽性對照組給腦復康 10 gö kg, 各組每天
分別灌胃1 次, 連續(xù)給藥14 d。于第15 d 給藥后4 h
進行跳臺訓練, 訓練前 15 m in ip 氫溴酸東莨菪堿
2 m gö kg, 對照組注射等容量生理鹽水。按分組分批
將小鼠放入跳臺儀, 先適應 3 m in, 然后通電, 小鼠
受電擊后跳上跳臺, 避免電擊。訓練 5 m in 并記錄
5 m in內(nèi)觸電次數(shù), 為錯誤反應次數(shù)。24 h 后重新測
試, 記錄5 m in 內(nèi)觸電次數(shù)和**次觸電潛伏期(表
2)。
表2　健脾**方對氫溴酸東莨菪堿所致小鼠記憶障礙的影響(x q±s)
組　別 給藥量(gö kg) 東莨菪堿(mgö kg) 潛伏期(s)　 5 m in 內(nèi)錯誤次數(shù)(次)組　別 給藥量(gö kg) 東莨菪堿(mgö kg) 潛伏期(s)　 5 m in 內(nèi)錯誤次數(shù)(次)
對照組 對照液 生理鹽水 24713±5818 015±015
模型組 對照液 2 10611±4912△ 119±018△
腦復康 1010 2 23511±59153
019±0193
健脾**方É 1112 2 19418±43143 3
110±0153
健脾**方Ê 2213 2 22719±66133 3
017±0173 3
健脾**方Ë 4416 2 23614±57113 3
014±0153 3
與模型組比較 3
　P < 0105,
3 3
　P < 0101; 與對照組比較 △ 　P < 0101
　　表 2 結果表明: 模型組與對照組比較, 模型組潛
伏期顯著縮短, 5 m in 內(nèi)跳下次數(shù)顯著增多, 說明氫
溴酸東莨菪堿造成了記憶障礙。健脾**方大、中、
小劑量組及腦復康組與模型組比較, 潛伏期顯著延長, 5 m in 錯誤次數(shù)降低, 說明健脾**方對氫溴酸
東莨菪堿所致小鼠記憶獲得障礙有改善作用。
21212 健脾**方對 400 m lö L 乙醇所致小鼠記憶
獲得障礙的影響: 分組及給藥同上一實驗。采用避暗
法[ 1 ]
, 第 15 d 于給藥后 1 h 開始訓練、 24 h 后測試,
在測驗前 30 m in 分別灌胃 400 m lö L 乙醇 011 m lö
10g, 對照組灌等量生理鹽水, 測定時將小鼠放入明
箱, 記錄小鼠放入明箱到進入暗箱的潛伏期及 5
m in 內(nèi)錯誤次數(shù)為記憶指標(表3)。
表3　健脾**方對400 m lö L 乙醇所致小鼠記憶再現(xiàn)障礙的影響(x q±s)
組　　別 給藥量 (gö kg)
400 m lö L 乙醇 (011 m lö 10 g)
潛伏期　　 (s)　　
5 m in 內(nèi)錯誤　
次數(shù)(次)　
對照組 1010 生理鹽水 20219±6219 110±017
模型組 1010 011 4012±1411△ 317±112△
腦復康 1010 011 9114±24193
210±0173
健脾**方É 1112 011 14516±34133 3
119±0183
健脾**方Ê 2213 011 18617±53103 3
115±0173 3
健脾**方Ë 4416 011 14814±37103 3
118±0183
　　與模型組比較 3
P < 0105,
3 3
　P < 0101; 與對照組比較 △P < 0101
　　 表 3 結果表明: 模型組與對照組比較, 潛伏期
明顯縮短, 5 m in 內(nèi)錯誤次數(shù)增加, 說明小鼠按 011
m lö 10 g 體重給 400 m lö L 乙醇已造成記憶再現(xiàn)障
礙。給藥組與模型組比較, 潛伏期延長, 5 m in 內(nèi)錯
誤次數(shù)減少, 說明健脾**方對記憶再現(xiàn)障礙有較
好改善作用。
端尾對“Y”型叉口輕放入水中, 以其在 15 m in 內(nèi)抵
達平臺為正確反應, 休息 15 m in 后重復訓練, 每天
訓練 10 次, 連續(xù) 5 d, 訓練過程中繼續(xù)**灌胃, 以
各組小鼠每天平均反應百分率和正確反應平均數(shù)為
指標, 實驗結果見表 4 (數(shù)據(jù)為 5 d 訓練的平均數(shù))。
結果表明, 模型組每天正確反應平均數(shù)和百分率均21213 健脾**方對****鈉所致小鼠方向辨別
障礙的影響: 分組給藥同上一實驗。訓練與測試采用
水迷路法[ 2 ]
, 于給藥 14 d 后開始訓練。水深約
10 cm ,水溫保持在(25±1) ℃左右。每天訓練前30
m in 模型組和給藥組分別 ip 注射****鈉 115
m gö kg, 對照組 ip 等量生理鹽水。每批實驗每組 2
只, 經(jīng)30 m in 后第2 批給藥。訓練時將小鼠從長臂
低于空白對照組, 有非常顯著性差異(P < 0101)
明造模成功; 健脾**方大、中、小劑量組及腦復
組正確反應平均數(shù)和百分率與模型組比較均有
加, 亦呈非常顯著性差異(P < 0101) , 表明健脾補
方對****鈉所致小鼠方向辨別障礙有改善
用。
表4　健脾**方對****鈉所致方向辨別障礙的影響
組 別 給藥量
(gö kg)
****鈉
(mgö kg)
正確反應平均數(shù)
(次)
正確反應百分率
(% )
對照組 對照液 生理鹽水 515 55
模型組 對照液 115 219△ 29△
腦復康 1010 115 6193 3
693 3
健脾**方É 1112 115 5183
583
健脾**方Ê 2213 115 7113 3
713 3
健脾**方Ë 4416 115 6163 3
663 3
　　與模型組比較 3
P < 0105, 　　3 3
P < 0101; 與對照組比較 △P < 0101
213　健脾**方對小鼠膽堿脂酶活性的影響
分組給**法如上, 眼球摘除取血, 取血后斷頭
處死, 迅速取出全腦, 放入冰冷的生理鹽水中沖洗,
表5　健脾**方對小鼠全腦膽堿脂酶
活性的影響(x q±s)　　 　取腦組織 100 m g, 用 011 mo lö L pH 714 PBS 制成
勻漿, 改良 Ellm an 法測定小鼠全腦膽堿脂酶活
力[ 4 ]
。表5 結果表明: 健脾**方大、中、小劑量組與
模型組比較, 膽堿脂酶活性顯著降低, 說明健脾**
方對氫溴酸東莨菪堿所致小鼠膽堿脂酶活性增加有
一定抑制作用。
組 別 (gö kg) (mgö kg) (Uö g 腦組織)
對照組 N S N S 79109±7111
模型組 N S 2 91157±9184
健脾**方É 1112 2 83125±81393
健脾**方Ê 2213 2 61105±101283 3
健脾**方Ë 4416 2 59166±51743 3
　與模型組比較 3
P < 0105, 　3 3
P < 01013　討論
典型的反轉(zhuǎn)回復( IR )序列包括一個 180°射頻
脈沖和一個 90°脈沖。在 IR 序列中 180°脈沖到 90°
脈沖之間所經(jīng)過的時間稱反轉(zhuǎn)回復時間(T I)。IR 序
列依其T I時間的不同分為以下 3 類: ①長T I : 1500
～ 2000 m s, 為液體衰減反轉(zhuǎn)回復脈沖序列, 又稱為
FLA IR (F lu id A t tenuat ion IR )序列, 是通過 IR 法
獲得的T 2 加權像。②中長T I : 1500～ 700 m s, 為標
準的 IR 序列。③短T I : 100～ 150m s, 為本文所介紹
的 IR 方式: FM P IR (FastM u lt ip lanar IR )或 ST IR
(Sho r t T im e IR )序列[ 3 ]
。
FM P IR 序列采用短時間 T I使脂肪的縱向磁
化矢量到達標軸的零點時, 給予 90°脈沖, 在較短的
TE 時間內(nèi)進行信號采集, 這時的脂肪磁化矢量幾
乎等于 0, 故FM P IR 序列所采集的信號中不含脂肪
組織信號, 從而達到抑制脂肪的目的[ 2 ]
。
大部分病變組織富含水成分, 在MR 圖像中呈
長T 1、長T 2 表現(xiàn), 如腫瘤、炎性滲出、出血骨折等。
而 FM P IR 序列對這類含水組織極為敏感, 表現(xiàn)為
極高信號, 使病變凸顯。所以FM P IR 序列對所有病
與 SE 序列相比, FM P IR 序列也有其缺點。首
先, 信噪比較低, 空間分辨率較差, 背景的顯示也不
如SE 序列清晰。其次, 所有病變組織信號均為高信
號,不利于病灶的定性[ 1 ]
。盡管FM P IR 序列具有上
述缺點, 但因其對病灶的高敏感性, 脂肪抑制、短時
間、多方位的采集方式等諸多優(yōu)點[ 6 ]
, 在骨關節(jié)MR
檢查中, 可作為SE 序列的重要補充[ 4 ]
。
參　考　文　獻
1　翟邵華, 周燕發(fā), 王承緣等 1ST IR 序列在胸部MR 檢查
中的應用1中國醫(yī)學影像技術, 1997, 13 (增刊) : 4
2　彭振軍主編, 影像磁共振成像技術, 武漢: 湖北科學技術
出版社, 1997130～ 33
3　陳　忠, 蘇榮森 1FLA IR 序列在腦部MR I的應用初探
臨床放射學, 1997, 16 (4) : 201
4　賀　涓, 廉宗徵 1 骨髓**的磁共振成像 1 國外醫(yī)學臨
床放射分冊, 1996, 19 (6) : 325
5　Sundaram M. M cleodMR imaging of tumo r and tomo
like lesions of bone and sof t t issue . AJR, 1990, 155 (4)
817
6　于　群, 劉定西, 曾祥階等1磁共振快速掃描技術在脊柱
掃描中的應用 1臨床放射學, 1995, 14 (2) : 106
(1998203223　收稿)　　(上接第 75 頁)
3　討論
中醫(yī)理論認為,“脾為先天之本, 氣血生化之
源” ;“腎主骨生髓”、“腦為髓之海”。臨床所見脾腎虧
虛患者多有智能衰退的表現(xiàn), 乃因氣血虧損、心脾兩
虛而致神明失養(yǎng); 腎精不足, 髓海空虛而致心腦失
用, 從而均可引起學習記憶功能的下降。健脾**方
為我研究所根據(jù)中醫(yī)理論并結合自己的臨床經(jīng)驗而
擬定的**老年虛證患者記憶力減退的協(xié)定**,
臨床觀察表明該方具有補養(yǎng)心脾、填精固腎、**益
智等功效。為了探討健脾**方的藥理作用機制, 我
們進行了有關健脾**方對改善動物學習記憶作用
的實驗研究。本研究除了觀察健脾**方對正常動
物記憶影響外, 并采用了氫溴酸東莨菪堿、乙醇、戊
***鈉造成學習記憶障礙和方向辨別障礙等動物
模型, 觀察其對學習記憶和空間識別的影響。研究結
果發(fā)現(xiàn), 不同劑量的健脾**方不僅能增強正常幼
齡小鼠的學習記憶能力, 而且能明顯對抗氫溴酸東
莨菪堿對小鼠記憶獲得的破壞、乙醇對小鼠記憶再
現(xiàn)的缺失和****鈉對小鼠**神經(jīng)的抑制, 并
能抑制**神經(jīng)系統(tǒng)膽堿脂酶的活性。其改善學習
記憶和對方向辨別障礙的作用可能與興奮**神經(jīng)
系統(tǒng), 尤其與興奮膽堿能神經(jīng)有關。健脾**方可能
通過作用于**膽堿能神經(jīng)而起到改善學習記憶的
作用。
參 考 文 獻
1　錢伯初 1 蜂花粉改善學習記憶功能的實驗研究 1 中藥藥
理與臨床11988, 4 (1) : 19
2　李儀奎, 王欽茂, 周金黃等 1 中藥藥理實驗方法學 1 上
海: 上?？茖W技術出版社, 19911172～ 175
3　徐秋萍, 孫建寧, 朱承喜等 1 復方黨參對***鈉引起小
鼠方向辨別障礙的改善作用 1 中藥藥理與臨床, 1989,
(2) : 25
4　袁伯俊, 秦伯益 1 環(huán)苯砜對乙酰膽堿脂酶的抑制作用
中國藥理學報, 1990, 11 (2) : 126
(1998206223　收稿)
劑量 東莨菪堿 膽堿脂酶活性