【摘要】目的 研究中等負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)心理應(yīng)激大鼠行為和外周血氧自由基的影響。方法健康的雄性SD大鼠32只,隨機(jī)分為對(duì)照組、心理應(yīng)激組、運(yùn)動(dòng)組和運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組,實(shí)驗(yàn)后測(cè)定大鼠的開場(chǎng)行為以及外周血自由基的變化情況。結(jié)果 ①心理應(yīng)激組、運(yùn)動(dòng)組以及運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組(分別為64. 37±16. 90,59. 63±13. 45,54. 88±10. 68)與對(duì)照組(43. 25±16. 42)比較數(shù)都有顯著的增加( P<0. 05);伸高次數(shù)(分別為16. 63±5. 09,10. 00±6. 85,17. 00±10. 77)與對(duì)照組(23. 88±6. 79)相比較都有所降低,且心理應(yīng)激組和運(yùn)動(dòng)組具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0. 05) ②心理應(yīng)激組、運(yùn)動(dòng)組(分別為78. 13±18. 10和56. 48±19. 21)與對(duì)照組(36. 90±4. 19)比較SOD的活性顯著增強(qiáng)( P<0. 05) ,運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組SOD的活性(36. 90±4. 19)降低;而MDA濃度的變化,心理應(yīng)激組(8. 63±3. 18)與對(duì)照組(4. 90±1. 58)比較顯著增加( P<0. 01) ,運(yùn)動(dòng)組(2. 76±1. 60)顯著降低( P<0. 01) ,運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組下降但差異無顯著性。結(jié)論中等負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可以通過降低心理應(yīng)激反應(yīng)的強(qiáng)度,拮抗心理應(yīng)激對(duì)機(jī)體的損傷。

【關(guān)鍵詞】中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練; 心理應(yīng)激; 開場(chǎng)行為測(cè)試; SOD; MDA

本研究通過對(duì)SD大鼠進(jìn)行中等負(fù)荷強(qiáng)度游泳的訓(xùn)練,并施加大強(qiáng)度的噪音刺激,測(cè)定大鼠行為和外周血氧自由基MDA的濃度變化及SOD的活性,以探討心理應(yīng)激、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練及其他們交互作用對(duì)機(jī)體的影響,為進(jìn)一步研究運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練作為一種減輕心理應(yīng)激應(yīng)對(duì)方式提供理論依據(jù)。材料與方法

一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及喂養(yǎng)

健康的雄性SD大鼠32只(購自中國科學(xué)院上海動(dòng)物研究中心),隨機(jī)分為4組,即對(duì)照組、心理應(yīng)激組、運(yùn)動(dòng)組、運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組,每組8只。分籠飼養(yǎng),每籠4只,飼養(yǎng)選擇塑料制品,并配有不銹鋼罩、塑料吸水瓶和鋁吸水管,飼養(yǎng)溫度15～16℃,國家標(biāo)準(zhǔn)固體混合飼料喂養(yǎng),自由進(jìn)食。

二、實(shí)驗(yàn)方法

(1)運(yùn)動(dòng)條件:玻璃鋼游泳池, (150cm×60cm×70cm),水深60cm,超過大鼠身長2倍,水溫31～32℃。(2)運(yùn)動(dòng)方式:無負(fù)重游泳,每天1次,每次60min,每周6次。(3)心理應(yīng)激模型:將大鼠每天定時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)給予噪音刺激,刺激強(qiáng)度為105dB,噪音為不間斷的“嗚嗚”聲, 1次/d,每次2h,持續(xù)3周。實(shí)驗(yàn)區(qū)與飼養(yǎng)區(qū)在溫度,光照條件保持一致。(4)分組和訓(xùn)練方案:對(duì)照組:平時(shí)不運(yùn)動(dòng),飼養(yǎng)條件與訓(xùn)練組相同;心理應(yīng)激組:前7周與對(duì)照組相同,從第8周起將大鼠每天定時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)給予噪音刺激,刺激強(qiáng)度為105dB,噪音為不間斷的“嗚嗚”聲, 1次/d,每次2h,持續(xù)3周。運(yùn)動(dòng)組:前3d適應(yīng)性游泳30min,然后每天游泳1次,每次60min,共10周。運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組:前7周與運(yùn)動(dòng)組相同,從第8周起,再同時(shí)附加105dB噪音刺激,心理刺激與運(yùn)動(dòng)分別在下午和晚上進(jìn)行,應(yīng)激方式和應(yīng)激組相同。

三、開場(chǎng)行為測(cè)定

末次心理應(yīng)激前24h,將動(dòng)物置于高40cm、直徑80cm、周壁為黑色、底面被分成面積相等的25塊組成的曠場(chǎng)里。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)隔音,光照度約60Lx。觀察3min SD大鼠的行為,以穿越底面的塊數(shù)為水平爬格活動(dòng)得分,以兩腳離地伸高的次數(shù)為站立性行為的得分。

四、SOD活性和MDA含量的測(cè)試

1.取材:大鼠噪音末次應(yīng)激后24h,依次麻醉,從腹腔主動(dòng)脈處各取血2ml,分別置于2個(gè)玻璃試管中,用于測(cè)定SOD、MDA的含量。

2. 測(cè)定方法: SOD活性采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定,MDA采用TBA縮合比色法測(cè)定, SOD和MDA試劑盒購自南京建成生物工程技術(shù)有限公司;組織勻漿液蛋白定量采用考馬氏亮藍(lán)法。測(cè)定儀器: 7522紫外分光光度計(jì)。

五、結(jié)果處理

所有數(shù)據(jù)由SPSS軟件分析處理,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、具有交互作用的雙因素方差分析。

結(jié) 果

一、中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)心理應(yīng)激大鼠開場(chǎng)行為的影響，結(jié)果顯示,心理應(yīng)激組、運(yùn)動(dòng)組以及運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組與對(duì)照組進(jìn)行比較, SD大鼠爬格次數(shù)都有顯著的增加( P<0. 05)。

二、中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)心理應(yīng)激大鼠氧自由基的影響就SOD活性而言,心理應(yīng)激組、

運(yùn)動(dòng)組以及運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組與對(duì)照組進(jìn)行比較,心理應(yīng)激組、運(yùn)動(dòng)組SOD的活性顯著增強(qiáng),且運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組SOD的活性降低。

討 論

開場(chǎng)反應(yīng)(openfield)又稱戶外情景反應(yīng),現(xiàn)在已經(jīng)作為研究動(dòng)物恐懼、緊張情緒的重要指標(biāo)。目前心理應(yīng)激對(duì)開場(chǎng)行為的研究結(jié)果存在分歧,一些研究支持動(dòng)物因心理應(yīng)激而產(chǎn)生緊張、恐懼(情緒性)時(shí)會(huì)發(fā)生爬格減少,僵硬、自立活動(dòng)減少等現(xiàn)象,也有結(jié)果支持動(dòng)物因心理應(yīng)激而產(chǎn)生爬格次數(shù)增加、探究活動(dòng)增強(qiáng)等現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)研究表明,心理應(yīng)激組SD大鼠曠場(chǎng)中的爬格數(shù)增加,伸高次數(shù)顯著減少,說明心理應(yīng)激對(duì)大鼠行為產(chǎn)生明顯影響。目前已有許多的研究表明,通過誘發(fā)的自由基反應(yīng)可以對(duì)腦、肝以及心臟等組織造成損傷。測(cè)試

MDA的量可以反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度,間接地反映細(xì)胞損傷的程度,而SOD活力的高低間接反映機(jī)體**氧自由基的能力,通過SOD與MDA的結(jié)果分析,對(duì)于**的病因?qū)W探討,**有著重要的意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,心理應(yīng)激組血液中MDA的濃度顯著增加,運(yùn)動(dòng)組MDA的濃度顯著降低。通過分析運(yùn)動(dòng)心理應(yīng)激組的含量大于運(yùn)動(dòng)組而小于心理應(yīng)激組結(jié)果可以知

道,運(yùn)動(dòng)與噪音刺激對(duì)大鼠血液MDA的濃度變化有交互作用,中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練可能是通過降低噪音刺激產(chǎn)生MDA的濃度,拮抗噪音應(yīng)激對(duì)機(jī)體造成的損傷。對(duì)SOD活力的測(cè)定結(jié)果表明,心理應(yīng)激組和運(yùn)動(dòng)組的活力都有顯著的提高;中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能提高SOD的活力,這已經(jīng)被許多的研究證明,而已有一些研究支持心理應(yīng)激后SOD的活力下降,這可能因?yàn)楦?/font>

等動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)只有兩種SOD即銅鋅2SOD(CuZn2SOD)與錳2SOD(Mn2SOD), 二者相加等于總的SOD(T2SOD),而兩者在應(yīng)激時(shí)誘導(dǎo)需要的閾值和時(shí)相上有差異,這就造成不同實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和測(cè)量方法存在不同結(jié)果的必然。同時(shí)通過雙因素分析可知,中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練與心理應(yīng)激對(duì)外周血SOD活力有顯著的交互作用。